gfp-lc3单荧光实验方法 GFP-LC3(绿色荧光蛋白-LC3)单荧光实验方法用于研究细胞自噬过程,以下是一种常用的实验方法: 材料: 1. GFP-LC3表达质粒 2.哺乳动物细胞系(如HEK293细胞) 3. PBS缓冲液 4. HEPES缓冲液 5.离心管 6.细胞培养培养基 7.离心机 8.荧光显微镜 步骤: 1.将GFP-LC3表达质粒转染至哺乳动物...
其中,电镜观察法由于受到实验条件和设备的限制应用范围有限;而由于自噬过程发生快速,通过IB/WB检测LC3-II水平和GFP-LC3的方法易受到实验进行时长的影响。 想要准确检测自噬流的变化,需要多种技术手段共同使用,才能达到理想的实验效果,产生具有说服性的实验结果。 三.自噬双标病毒产品 mCherry-GFP-LC3B腺病毒 mCherry-...
1 μM Obatoclax处理K1细胞24h后，GFP-RFP-LC3阳性自噬斑点显著增加；TEM观察表明(图B)，Obatoclax处理后，K1细胞出现与溶酶体共定位的自噬囊泡形成，并且损伤的溶酶体或大泡明显增加，间接表明Obatoclax中和了溶酶体。
本期主要介绍了自噬检测方法,并对各个检测方法的优缺点进行了总结(见表2),实验中需根据实验目的选择合适的方法。汉恒生物研发了多种LC3标记的病毒,如GFP-LC3、RFP-GFP-LC3等,不仅可提供用于细胞实验的慢病毒和腺病毒,还可提供用于动物实验的腺相关病毒。更多关于自噬检测的问题,欢迎咨询汉恒生物! 参考文献: [1]...