PCR早已是分子生物学实验的常规技术,但是GC-rich扩增始终是有难度的应用。以人基因组为例,大约3%的序列可划为GC-rich序列,尤其是在启动子,增强子等控制元件,GC-rich序列更为常见。因此,GC-rich片段的PCR扩增困难,也就阻碍了有关这类序列的科研进展。人基因组典型GC-Rich序列 GC-Rich片段案例:FMR1 脆性X综...
Betaine和DMSO据报道会轻微降低DNA聚合酶保真度,所以严谨的生产厂商是不宜将其作为一个通用的成分去用到所有的PCR产品内的。Betaine在PCR体系终浓度为0.5-2M。DMSO在PCR体系浓度为2-8%(v/v),DMSO熔点较低,低于18℃是固态冰状。因此,注意不要放在冰上待用,否则会一直无法吸取。这两种试剂可从Sigma公司购买。 额...
GC-rich PCR Buffer (4管套装)提供了4种不同的GC-rich PCR Buffer,为扩增高GC含量的DNA片段提供了多种不同的选择,大大提高了高GC含量DNA片段的扩增成功率。 各种GC-rich PCR Buffer可以单独使用,也可以组合使用。这样可以在更多条件下优化PCR条件。
GC rich PCR 通过添加增效剂、正交试验设计优化PCR反应体系、联合采用多种PCR程序等措施,建立并优化了PCR扩增体系,成功地从高GC青枯菌基因组中扩增出了长度为2434bp且GC含量高达70.9%的aac基因。PCR反应体系为20uL包括5%DMSO、2.5mmol/LMgCl2、500umol/LdNTP、10pmol/L引物、1.25UTaq酶、50ng模板DNA。首...
PCR master mixes Custom business friendly and automation-ready solutions Application-specific PCR Other PCR-related products PCR thermal cyclers Contact Sales PrimeSTAR GXL helps find EBV link to lymphoma Standard PCR PCR FAQs GC-rich templates, such as the 5' ends of many mammalian cDNAs, are ...
在此实验中,使用GC-rich序列,针对FA与甜菜碱的浓度及添加时间进行了研究。结果是,通过添加PCR添加剂,即使在GC含量高于70%的情况下,也可获得PCR产物。 另一方面,在循环测序中如果添加PCR添加剂,不仅会降低信号强度,还会在波形数据中混入干扰峰,碱...
PCR扩增不出来条带的原因有很多,诸如引物设计有误,DNA模板已降解,酶失活或者有杂酶污染,缓冲液条件不当,模板DNA的GC含量太高等等。大部分原因可以通过换试剂得到解决,但是对于高GC含量的样本,扩增起来始终是有难度。 模板GC含量高就难以扩增的原因在于G、C之间形成三对氢键,解链所需能量较高,故模板较难打开,在...
GC-rich PCR Buffer(4管套装)提供了4种不同的GC-rich PCR Buffer,为扩增高GC含量的DNA片断提供了多种不同的选择,大大提高了高GC含量DNA片断的扩增成功率。 各种GC-rich PCR Buffer可以单独使用,也可以组合使用。这样可以在更多条件下优化PCR条件。 提供了推荐的几种经过优化的GC-rich PCR Buffer的组合方式,便...
GC-rich PCR Buffer (4管套装)提供了4种不同的GC-rich PCR Buffer,为扩增高GC含量的DNA片段提供了多种不同的选择,大大提高了高GC含量DNA片段的扩增成功率。 各种GC-rich PCR Buffer可以单独使用,也可以组合使用。这样可以在更多条件下优化PCR条件。
GC-rich PCR Buffer (4管套装)提供了4种不同的GC-rich PCR Buffer,为扩增高GC含量的DNA片段提供了多种不同的选择,大大提高了高GC含量DNA片段的扩增成功率。 各种GC-rich PCR Buffer可以单独使用,也可以组合使用。这样可以在更多条件下优化PCR条件。