从进化的角度上考虑,Flp/FRT系统是Cre/loxP系统在真核细胞内的同源系统。其中.重组酶Flp是酵母细胞内的一个由423个氨基酸组成的单体蛋白。与Cre相似,Flp发挥作用也不需要任何辅助因子,同时在不同的条件下具有良好的稳定性。该系统的另一个成分Flp识别位点(Flp recognition target,FRT)与loxP位点非常相似,同样由两个...
FLP是一个重组酶(flippase,Flp),类似于Cre,它识别的位点是FRT,当FRT在同一条DNA上且方向相同时,则两FRT位点之间的基因则被删除;FRT方向相反,则基因被倒转。FRT:short flippase recognition target (FRT)。 Red recombination system中的质粒pCP20(42°培养可消除)就用于表达FLP重组酶识别FRT消除抗性。
条件性基因敲除的基本原理 Flp / FRT 系统 该系统与Cre/loxP系统相同,也是由一个重组酶和一段特殊的DNA序列组成。从进化的角度上考虑,Flp/FRT系统是Cre/loxP系统在真核细胞内的同源系统。其中.重组酶Flp是酵母细胞内的一个由423个氨基酸组成的单体蛋白。与Cre相似,Flp发挥作用也不需要任何辅助因子,同时在不同的...
FLP is a recombinase and FRT defines target sites of transposable elements (see Fig. F30 ). The system is very similar to the Cre-loxP of bacteriophage P1. The 43-kDa "flip" (FLP) is encoded by the 2渭 circular yeast plasmid. Recombination (X) takes place within the core sequence ...
Flp/FRT is a system analogous to the cre/loxP system. Flp is an yeast enzyme that recognizes FRT sites. If two FRT sites have a parallel orientation, the DNA segment between these sites will be deleted by the action of the Flp recombinase. ...
目前,Cre/LoxP、Flp/FRT重组系统是常用的条件性基因敲除方法。Cre/LoxP系统由Cre重组酶和LoxP位点组成。Cre重组酶能识别并切割特定的DNA序列(LoxP位点),介导基因序列的删除或重组。这一系统具有高效、特异性和灵活性,使研究人员能够对特定基因进行条件性敲除或敲入,以研究其在特定组织或时间点的功能。
摘要:作为标记基因剔除的重要手段之一的FLP/FRT位点特异性重组系统自发现以来,在植物基因工程研究 领域尤其是标记基因的删除方面得到了广泛应用,已成为提高转基因植物安全性的有效方法.文章就FLP/FRT位点特异性重组系统的基本概况及其在植物基因工程中标记基因删除方面的应用进行综述,并讨论了其在实际应用中的利弊与在分子...
摘要:来源于酵母2 μm质粒的FLP/FRT位点特异性重组系统已经被广泛应用于拟南芥、水稻、小鼠、果蝇、线虫等高等真核模式生物,正逐渐成为转基因动植物研究领域进行基因操作的强有力工具。笔者综述了FLP/FRT系统的重组原理及其在高等真核生物中的应用,系统地概述了该系统在转基因植物、哺乳动物、昆虫以及其它相关高等真核...
有没有做FRT-FLP系统的大神,求指导啊。做了半天都没有看到结果
1.利用双转基因和Flp-Frt技术,在CRE的翻译起始密码子前加入一个“STOP“原件,可以抑制下游CRE的表达。在“STOP“原件的上下游各加上一个Frt序列,利用Flp重组酶,可以特异的删除两个Frt序列间的“STOP“原件,这时其下游的Cre重组酶可以表达。我们在Cre和Flp的表达质粒前各加上组织特异性的启动子,只有在这两个启动...