1. 别藻青蛋白(allophycocyanin,APC):APC最大发射波长为660 nm,其标记的抗体适用于所有配备氦氖激光器的流式细胞仪,检测通道一般是FL4通道。FITC、PE和APC搭配是经典3色搭配。2. Cy5:Cy5属于小分子染料,其最大发射波长为670 nm,其标记的抗体适用于所有配备633 nm氩离子激光器的流式细胞仪,检测通道一般...
综上所述你的三染模型理论上是可以行的通的,Fitc 选择 488 激光管激发,PE选择543激光管激发,而APC选择633 激光管激发即可,至于颜色可以选择绿,红,蓝,或者绿,红,紫色(或者灰白色),至于蓝色可以用来染色DAPI。 我还是觉得采用激光共聚焦的顺序扫描应该可以完全解决串色干扰的问题。至于颜色,可以自己调节。 如果你...
因为 Cy5的激发波长与 APC 的激发波长相近,所以 PE-Cy5 荧光素中的 Cy5,也会被激发 APC 的第二个激光器(氦氖激光器)所激发,导致 PE-Cy5 与 APC 的颜色补偿很难调。相反,PE-Cy5.5 中的 Cy5.5 激发波长为675nm,不能被激发 APC 的第二个激光器所激发,也就不存在 Cy5.5 对 APC的干扰,颜色补偿也就很...
在流式细胞术或荧光标记实验中,FITC(异硫氰酸荧光素)、PE(藻红蛋白)和APC(别藻青蛋白)是三个常用的荧光通道。每个通道都有其特定的激发和发射波长,因此在选择染料进行配色时,需要确保所选染料的光谱特性与通道相匹配,并尽量减少荧光溢出和补偿问题。FITC通道 推荐染料:FITC本身就是一种常用的绿色荧光染料...
应用:PE通道常用于标记细胞表面的其他抗原或进行多色流式细胞术中的另一种颜色区分。 APC通道 推荐染料:APC(别藻青蛋白)是一种红色荧光染料,其激发波长为630nm左右(也有说法为660nm),发射波长为660nm左右(也有说法为675nm)。在APC通道中,应选择红色光谱范围内且光谱特性与APC相匹配的荧光染料。 应用:APC通道因...
以FITC-PE为例。在散点图上,划分为四个象限。如果纵坐标是FITC, 横坐标是PE。调节电压后,阴性的细胞位于左下象限。这是可以得出阴性细胞横坐标(PE)和纵坐标(FITC)的平均荧光强度值。电压调好以后,上单色阳性样本。比如上牌FITC阳性,这时不要再改变电压了,而是调节补偿系数,最终目的就是让...
以FITC-PE为例。在散点图上,划分为四个象限。如果纵坐标是FITC, 横坐标是PE。调节电压后,阴性的细胞位于左下象限。这是可以得出阴性细胞横坐标(PE)和纵坐标(FITC)的平均荧光强度值。电压调好以后,上单色阳性样本。比如上牌FITC阳性,这时不要再改变电压了,而是调节补偿系数,最终目的就是让...
做补偿调节,需要以下的样本,无任何染色的样本,分别是FITC,PE,PerCP还有APC单染阳性的样本,所以你这里需要一共5个管子。在纯手工的年代,你需要画出这四个颜色两两配对的散点图,比如FITC-PE,FITC-PerCP,FITC-APC,PE-PerCP,PE-APC,PerCP-APC,这一共6个散点图。然后,先上未染色的样本,调节各个荧光通道的...
1.准备好流式管,每种荧光抗体一个;2.将微球翻转或者涡旋混匀;3.在每管中加入一滴微球;4.在管中分别加入相应的1test抗体(不同抗体1test的用量不同,具体参见说明书);5.敲击或者涡旋混匀;6.2-8℃暗处孵育15-30分钟;7.每管加2ml流式染色缓冲液,400-600xg离心3-5分钟;8....
求教FITC PE APC免疫荧光共染网友 1 最佳答案 回答者:网友 我还是觉得采用激光共聚焦的顺序扫描应该可以完全解决串色干扰的问题。至于颜色,可以自己调节。 如果你的共聚焦显微镜的荧光染料库里没有你所用给的染料,简单的办法就是选择跟你的染料的最接近的染料,而不是随便就选择一个。 如果共聚焦显微镜的配置有光...