酶标抗体法,又名酶联免疫吸附法(ELISA),利用酶标记抗原或抗体以检测相应抗原或抗体的一种免疫学标记技术。其基本原理是使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性,而相对应的抗体或抗原与某种酶连接成酶标抗体或抗原,酶标抗体或抗原既保留了免疫活性可以与固相载体表面的抗原或抗体结合,又保留了酶...
在 ELISA 中血浆和血清可同等应用。血清标本可按常规方法采集,应注意避免溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质,以 HRP 为标记的 ELISA 测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性 HRP...
竞争ELISA 竞争ELISA既可用于检测抗体,也可用于检测抗原。以检测抗体为例,将抗原固定在固相载体上,首先加入待检抗体,再加入酶标抗体,则待检抗体就与酶标抗体竞争结合包被在固相载体上的抗原。通过洗涤洗掉未被竞争结合的酶标抗体,最后加底物显色,需要注意的是显色结果与待检抗原(或抗体)的量成反比。优点:可...
夹心ELISA:将捕获抗原的抗体(捕获抗体)附着在固相载体上,洗掉多余的未结合抗体后,添加抗原并被特异性捕获,通过直接ELISA或间接ELISA的形式检测抗原。这种组合进一步提高了检测的灵敏度和特异性,是最常见的ELISA实验形式。 图3 夹心ELISA步骤 源自RayBiotech官网 ...
elisa检测原理 Elisa检测原理。 ELISA(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)是一种常用的免疫学检测方法,广泛应用于医学、生物学、环境监测等领域。它通过酶标记抗体与抗原结合,再用底物染色来检测抗原或抗体的存在。ELISA检测原理主要包括固相吸附、特异性结合、酶标记、底物反应和测定等步骤。 首先,固相吸附是ELISA的第一...
一、原理ELISA是以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体──聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行,每加入一种试剂孵育后,可通过洗涤除去多余的游离...
1.ELISA方法的基本原理 (1)使抗原或抗体结合到固相载体表面,并保持其免疫活性。(2)使抗原或抗体与酶结合成酶标抗原或抗体,并保持抗原或抗体的免疫活性和酶的活性。(3)酶标的抗原或抗体与相应的抗体或抗原反应后,结合在免疫复合物上的酶催化底物形成水解、氧化或还原反应,形成有色物质,其颜色的深浅与标本...
竞争法ELISA一般用于检测小分子抗原。小分子抗原或半抗原因缺乏可作夹心法的两个以上的位点,无法同时与两种抗体结合因此不能用双抗体夹心法进行测定,故可以采用竞争法模式。一般常用于小分子、lgA、lgG、lgM等检测。该技术测抗原的原理是标本中的抗原和一定量的酶标抗原竞争与固相抗体结合。标本中抗原量含量愈多,结合...