小分子抗原或半抗原因缺乏可作夹心法的两个以上的位点，因此不能用双抗体夹心法进行测定，可以采用竞争法模式。其原理是标本中的抗原和一定量的酶标抗原竞争与固相抗体结合。标本中抗原量含量愈多，结合在固相上的酶标抗原愈少，最后的显色也愈浅。小分子激素、药物等ELISA测定多用此法。6.捕获包被法测抗体 IgM抗...
竞争ELISA 竞争ELISA既可用于检测抗体，也可用于检测抗原。以检测抗体为例，将抗原固定在固相载体上，首先加入待检抗体，再加入酶标抗体，则待检抗体就与酶标抗体竞争结合包被在固相载体上的抗原。通过洗涤洗掉未被竞争结合的酶标抗体，最后加底物显色，需要注意的是显色结果与待检抗原（或抗体）的量成反比。优点：可...
酶联免疫吸附剂测定法，简称酶联免疫法，或者ELISA法。它的中心就是让抗体与酶复合物结合，然后通过显色来检测。基本原理 ①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在测定时，把受检标本（测定...
ELISA，即酶联免疫吸附测定法，是一种灵敏、特异的免疫学分析方法，用于检测和分析样品中的抗原和抗体。其基本原理是利用抗原抗体的特异性结合反应，将待测样品中的抗原或抗体与酶标记的抗体或抗原结合，再通过洗涤和显色等步骤，对待测样品中的抗原或抗体进行定量或定性分析。ELISA方法可以用于检测血清、血浆、组织...
一、ELISA间接法间接法是检测抗体最常用的方法,其原理为:利用酶标记的抗抗体检测已与固相结合的受检抗体,故称为间接法。 1. 包被固相抗原:用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg/ml,在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3min,除去未结合的抗原及杂质。 2....
elisa检测原理 Elisa检测原理。 ELISA(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)是一种常用的免疫学检测方法,广泛应用于医学、生物学、环境监测等领域。它通过酶标记抗体与抗原结合,再用底物染色来检测抗原或抗体的存在。ELISA检测原理主要包括固相吸附、特异性结合、酶标记、底物反应和测定等步骤。 首先,固相吸附是ELISA的第一...
第一部分:Elisa的背景介绍 Elisa是一种非常敏感和特异的实验技术,被广泛应用于疾病诊断、药物筛选、蛋白质定量等领域。其原理是利用特异性抗原与抗体之间的结合反应,通过酶作用产生颜色或荧光信号,从而实现对目标物质的定量检测。 第二部分:Elisa的原理与步骤 1.血清处理 在进行Elisa实验之前,需要从样本中提取血清,并...
图1 ELISA原理图及分类 源自Excedr官网 在实际应用中,通过不同的设计,具体的方法步骤可有多种: 直接ELISA:抗原通过一段时间的孵育被动地附着在塑料固相载体上,经过简单的洗涤后,通过添加与酶共价连接的抗体来检测抗原。孵育和洗涤后,通过添加色原/底物使酶活性产生颜色变化来显色。在规定的时间后通过化学手段终止酶...