酶联免疫吸附实验(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)是将抗原或抗体结合在固相载体表面,利用抗原抗体的特异性结合以及抗体或者抗原上标记的酶催化特定底物发生显色反应,实现目标物检测的免疫分析方法,可测至皮摩尔(pmol)级别。 01技术原理 ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。 (1)将已知的抗体或抗原结合在某种
一、实验目的 二、ELISA实验原理 三、仪器和试剂 四、实验步骤 五、注意事项 六、参考文献 一、实验目的 1. 检测生物样品中抗体、抗原、蛋白质和糖蛋白等物质的含量。 2. 药物药效学评价、筛选。 二、ELISA实验原理 酶联免疫吸附测定(Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay,ELISA)是免疫学和分子生物学中广泛使用的...
直接 ELISA 的实验步骤有限，可让实验设置整体简化。它的缺点在于需要制备在每个实验中用来检测的各种偶联抗体。另外，包被抗原会非特异性地结合表面，因此它可能会在非天然结构中被呈递给抗体，从而导致更强的背景信号。这种检测方法不适合多种分析。通常，这种方式非常适合测定样品中的抗体量，例如感染后的血清抗体水平。
相较于其他类型的ELISA实验,直接ELISA实验步骤少,检测速度快,不需要用到二抗,避免了交叉反应,检测结果不容易出错。但是由于直接ELISA的抗原不是特异性固定的,样本中的靶蛋白及其他杂质蛋白都会与ELISA版结合,实验背景会比较高,而且直接ELISA每种靶蛋白都需要准备能够与其特异性结合的一抗...
固相载体在ELISA实验中作为吸附剂和容器，最常用的材料是聚苯乙烯，它能较强吸附蛋白，可用于吸附抗体（原）且仍能保留其原有的免疫学特性。成员一 包被用的抗原（体）,进行ELISA反应的第一步就是将抗原（体）固定在固相载体上，是通过抗原（体）自身结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团之间的引力结合完成的...
竞争法ELISA是酶标抗原与目标抗原竞争性与抗体结合,目标抗原浓度越高,显色约不明显,适用于小分子和激素定量。 不同类型的ELISA方法都有一个共同点,即最后一个结合的抗体总是与特定酶偶联,从而能够产生特定的反应。 二、ELISA实验前准备工作 2.1.选择试剂盒:第一、样本种属来...
一、ELISA实验步骤 1、固相载体选择 聚苯乙烯:具有较强的吸附蛋白质的性能，抗体或抗原吸附其上后仍保留原来的免疫学活性。聚氯乙烯:聚氯乙烯对蛋白质的吸附性能比聚苯乙烯高，但空白值也略高。良好的ELISA板应该是吸附性能好，空白值低，孔底透明度高，各板之间、同一板各孔之间性能相近。2、包被 ①板孔的选择:...
ELISA，即酶联免疫吸附测定，既能够用于检测抗原，也能够测定抗体的存在。在进行ELISA实验时，必不可少的三种试剂包括：首先是固相的抗原或抗体，它们的主要作用是结合到固相载体上，作为实验的基础。其次是标记的抗原或抗体，这些标记物在实验过程中起到关键的作用，用于识别和追踪特定的生物分子。最后是作用的底物，也...
以下是几种常见的ELISA实验方法 一、间接ELISA法 间接ELISA法是最常用的ELISA方法之一。其基本原理是将抗原固定在固相载体上,加入待测样本后,如果样本中存在特异性抗体,则与抗原结合形成抗原-抗体复合物。随后加入酶标记的二抗(针对一抗的抗体),与一抗结合形成酶标二抗-一抗-抗原复合物。最后加入底物,酶催化底物发生...
通过Elisa实验技术检测各样本中目的蛋白的表达。 二、实验样本 一、实验结果 1.标准品检测值 2.标准品标准曲线 图1Rat IL-4标准曲线 标准曲线结果显示,本次IL-4检测结果可信。 3.样品检测结果 图2 Elisa检测柱状图 一、ELISA实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠白细胞介素4(IL-4)水平。用纯化的...