ELISA 实验通常分为几个步骤:包被、封闭、孵育、检测和结果分析。 SO,接下来小 M 为大家带来实验必备的 Protocol! 2.1 直接 ELISA 直接ELISA 是检测抗原的最简单的方案。 将含有分析物的缓冲溶液加入 96 孔板中,让其粘附在塑料板上一段时间(图 2a)。在直接 ELISA 中,加入带有偶联酶的一级检测抗体,该抗体与覆...
酶联免疫吸附试验 (以下简称ELISA) ：是酶免疫测定技术中应用最广的技术。用于检测包被于固相板孔中的待测抗原(或抗体)。即用酶标记抗体，并将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面，使抗原抗体反应在固相载体表面进行，用洗涤法将液相中的游离成分洗除，最后通过酶作用于底物后显色来判断结果。正常值 待检血清与...
夹心ELISA:将捕获抗原的抗体(捕获抗体)附着在固相载体上,洗掉多余的未结合抗体后,添加抗原并被特异性捕获,通过直接ELISA或间接ELISA的形式检测抗原。这种组合进一步提高了检测的灵敏度和特异性。 图3 夹心ELISA分类及步骤 源自RayBiotech官网 竞争性ELISA:在竞争性ELISA中,固定量的标记抗原与样品抗原(样本)竞争与固定化...
间接酶联免疫吸附试验是测定抗体最 常用的一种酶联免疫吸附试验（ELISA）方 法，属非竞争结合试验。其原理是将抗原连 接到固相载体上，样品中待测抗体与之结合成固相抗原受检抗体复合物，再用酶标二 抗（针对受检抗体的抗体）与固相免疫复合 物中的抗体结合，形成固相抗原-受检抗体- 酶标二抗复合物，可用目测或...
酶联反应（ELISA），化学反应，结合在固相载体表面，基础是抗原或抗体的固相化。技术原理 ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。在测定时，受检标本（测定其中的抗体或抗原）与固相载体...
缺点:存在交叉反应的可能性(酶标二抗直接与抗原结合),可能会增加背景,同时与直接ELISA相比,间接ELISA实验多了二抗孵育的步骤,实验周期延长。 夹心法 被检测的抗原包被再两个抗体之间其中一个抗体将抗原固定于载体上,即捕捉抗体,另一个则是检测抗体,此抗体可...
酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)指将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上,利用抗原抗体特异性结合进行免疫反应的定性和定量检测方法。 ELISA 实验生物灵敏度高,特异性强,安全可靠,是免疫学中的经典实验,丁香实验在这里为大家准备了 ELISA ...
固相载体在ELISA实验中作为吸附剂和容器，最常用的材料是聚苯乙烯，它能较强吸附蛋白，可用于吸附抗体（原）且仍能保留其原有的免疫学特性。成员一 包被用的抗原（体）,进行ELISA反应的第一步就是将抗原（体）固定在固相载体上，是通过抗原（体）自身结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团之间的引力结合完成的...
一、ELISA实验步骤 1、固相载体选择 聚苯乙烯:具有较强的吸附蛋白质的性能，抗体或抗原吸附其上后仍保留原来的免疫学活性。聚氯乙烯:聚氯乙烯对蛋白质的吸附性能比聚苯乙烯高，但空白值也略高。良好的ELISA板应该是吸附性能好，空白值低，孔底透明度高，各板之间、同一板各孔之间性能相近。2、包被 ①板孔的选择:...