夹心ELISA:将捕获抗原的抗体(捕获抗体)附着在固相载体上,洗掉多余的未结合抗体后,添加抗原并被特异性捕获,通过直接ELISA或间接ELISA的形式检测抗原。这种组合进一步提高了检测的灵敏度和特异性,是最常见的ELISA实验形式。 图3 夹心ELISA步骤 源自RayBiotech官网 竞争性ELISA:在竞争性ELISA中,固定量的标记抗原与样品抗原(...
酶联免疫吸附实验(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)是将抗原或抗体结合在固相载体表面,利用抗原抗体的特异性结合以及抗体或者抗原上标记的酶催化特定底物发生显色反应,实现目标物检测的免疫分析方法,可测至皮摩尔(pmol)级别。 01技术原理 ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。 (1)将已知的抗体或抗原结合在某...
间接酶联免疫吸附试验是测定抗体最 常用的一种酶联免疫吸附试验（ELISA）方 法，属非竞争结合试验。其原理是将抗原连 接到固相载体上，样品中待测抗体与之结合成固相抗原受检抗体复合物，再用酶标二 抗（针对受检抗体的抗体）与固相免疫复合 物中的抗体结合，形成固相抗原-受检抗体- 酶标二抗复合物，可用目测或...
缺点:存在交叉反应的可能性(酶标二抗直接与抗原结合),可能会增加背景,同时与直接ELISA相比,间接ELISA实验多了二抗孵育的步骤,实验周期延长。 夹心法 被检测的抗原包被再两个抗体之间其中一个抗体将抗原固定于载体上,即捕捉抗体,另一个则是检测抗体,此抗体可...
酶联免疫吸附试验 (以下简称ELISA) ：是酶免疫测定技术中应用最广的技术。用于检测包被于固相板孔中的待测抗原(或抗体)。即用酶标记抗体，并将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面，使抗原抗体反应在固相载体表面进行，用洗涤法将液相中的游离成分洗除，最后通过酶作用于底物后显色来判断结果。正常值 待检血清与...
固相载体在ELISA实验中作为吸附剂和容器，最常用的材料是聚苯乙烯，它能较强吸附蛋白，可用于吸附抗体（原）且仍能保留其原有的免疫学特性。成员一 包被用的抗原（体）,进行ELISA反应的第一步就是将抗原（体）固定在固相载体上，是通过抗原（体）自身结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团之间的引力结合完成的...
竞争法ELISA是酶标抗原与目标抗原竞争性与抗体结合,目标抗原浓度越高,显色约不明显,适用于小分子和激素定量。 不同类型的ELISA方法都有一个共同点,即最后一个结合的抗体总是与特定酶偶联,从而能够产生特定的反应。 二、ELISA实验前准备工作 2.1.选择试剂盒:第一、样本种属来...
一、ELISA实验步骤 1、固相载体选择 聚苯乙烯:具有较强的吸附蛋白质的性能，抗体或抗原吸附其上后仍保留原来的免疫学活性。聚氯乙烯:聚氯乙烯对蛋白质的吸附性能比聚苯乙烯高，但空白值也略高。良好的ELISA板应该是吸附性能好，空白值低，孔底透明度高，各板之间、同一板各孔之间性能相近。2、包被 ①板孔的选择:...
以下是几种常见的ELISA实验方法 一、间接ELISA法 间接ELISA法是最常用的ELISA方法之一。其基本原理是将抗原固定在固相载体上,加入待测样本后,如果样本中存在特异性抗体,则与抗原结合形成抗原-抗体复合物。随后加入酶标记的二抗(针对一抗的抗体),与一抗结合形成酶标二抗-一抗-抗原复合物。最后加入底物,酶催化底物发生...