ECL Western特异发光检测试剂盒用于辣根过氧化物酶(HRP)标记的蛋白或核酸检测。下面以超敏型ECL发光液Enlight-Plus为例,说一下检测实验步骤。 1. 常规电泳、转膜、HRP 标记抗体或核酸探针孵育、洗膜。以下操作在…
ECL(electrochemiluminescence)是一种化学发光试剂,一般是Western blot实验中的最后一步,需要1:1混合溶液A和溶液B(一般使用的发光液A和B分别为鲁米诺和过氧化氢),混合液均匀覆盖PVDF膜,成像仪曝光后可显色观察实验结果。 鲁米诺是一种重要的化学发光试剂,它的氧化反应需要在碱性缓冲液中进行,在过氧化氢存在下形成激...
做Western Blot发光实验经常有“淬灭”的情况发生,经常有朋友反映,加发光试剂后立刻可以看到很明显的亮光,可亮光很快就消逝了,压完片后,条带却很弱,甚至什么也没有。这种情况发生的原因是什么? 要解释这种情况发生的原因,必须先了解ECL化学发光的原理。一般的发光试剂含鲁米诺和H2O2、发光增强剂等物质。发光试剂中的...
WB (Western Blot) 学习笔记——ECL法 蛋白质印迹 (Western blot, WB) 是一种通过凝胶电泳分离蛋白质,将其印迹转移到膜上,并对固定抗原进行选择性免疫检测的技术。这是一种重要的常规蛋白质分析方法,依赖于抗体-抗原相互作用的特异性,对于从复杂混合物中定性或半定量鉴定特定蛋白质及其分子量非常有用。 原理: E...
Western Blot Chemiluminescent HRP and AP substrates and Chromogenic HRP and AP substrates for brilliant detection Compare Sort By: Quick view Compare BrightStar™ Femto HRP Chemiluminescent Substrate, Pre-Mixed Single Component ECL Mix, 15mL $29.95 Add to Cart Quick view Compare BrightStar...
英文名称:BeyoECL UT Kit For Western Blot 产品货号:YTB061 产品规格:100mL|500mL本试剂盒是用作Western萤光检测试剂的一种极超敏的以luminol为基础的ECL化学发光试剂盒,发光效果显著优于BalbECL Star,可与二抗上偶联的辣根过氧化物酶发生化学反应,发出萤光,从而可以通过用X光片压片或其它适当化学发光成像设备检测样...
Western blot化学发光（ECL）出现高背景通常是由以下几个原因造成的：1. 抗体浓度过高：一抗或二抗浓度...
张X 光胶片，30 分钟或更长时间后全部取出显影。6. 对同一张膜进行多次蛋白杂交：用PBST 或TBST 洗涤掉发光液（10min×3 次），然后从开始一抗杂交即可。Western-blot中ECL发光液的选择很重要，Enlight-Plus检测级别可达pg级，发光时间长，背景低，得到的图像很漂亮，非常有利于实验的进行。
或者曝光时间没有调整好都有可能完成这样的结果，做这个实验建议加一个阳性对照，能很好很快找到真正的原因...
做Western Blot发光实验经常有“背景太高”问题的出现,要弄清楚“背景太高”的原因,先要知道“背景”是什么,“背景”也是发光,影响发光的因素就会影响背景。 影响发光的因素主要有: 1.含HRP的抗体; 2.发光试剂; 3.和发光试剂反应的杂质,如含杂质的膜。这里面,在很短时间内曝光造成的背景多是由于含HRP的抗体...