1. 转录因子研究：DNA Pull down 实验可用于鉴定能够结合特定基因启动子区域的转录因子，从而帮助理解基因表达调控的机制。2. DNA结合蛋白的鉴定：通过DNA Pull down，可以从复杂的蛋白质混合物中分离出特异性结合某个DNA序列的蛋白质，鉴定其生物学功能。3. 药物筛选：可以用于筛选能够抑制或促进蛋白质与DNA结合的小...
2. DNA pull down的技术流程 体外合成生物素标记的DNA片段→提取核蛋白(或总蛋白)→孵育→洗涤、洗脱互作蛋白→WB检测或质谱鉴定。 3. 适用范围 动物、细胞、植物组织、原生质体均可。 4. 客户提供 ①启动子序列(200-500bp为宜) ② 细胞/原生质体提供10的7次方,植物/动物组织提供1g以上 ③ 菌体0.5g以上 5...
（a）SDS-PAGE和银染色显示以CCRM1-1为探针的DNA拉下捕获的蛋白质；（b）通过DNA pull-down MS鉴定的与CCRM1-1结合的蛋白质成分；（c）基于PLACE数据库预测鉴定出的TF与CCRM1-1中顺式作用元件结合的基序；（d）基于小麦转录组数据库预测TF编码基因的时空表达谱。
1、 实验简介 DNA Pull down实验是用脱硫生物素标记特异性DNA探针，脱硫生物素探针可以和偶联在磁珠上的链霉亲和素亲和结合。提取物与磁珠-DNA探针孵育，作用蛋白质分子可以和DNA探针特异性结合；经过洗涤可以将非特异性结合蛋白质去除；用 Western Blot或质谱对产物进行检测分析。实验流程图：2、 DNA pull-down技术...
A:理论上说,若DNA单链能够与磁珠上的互补链杂交成功,是可以进行pull down实验的; 效率如何不好确定,这个取决于两条DNA单链是否能杂交成功、蛋白-DNA结合的强弱、蛋白的丰度等。 Q2: DNA pull down的 原理? A:针对目标区域设计特异性DNA探针并进行生物素标记,生物素探针可与偶联在磁珠上的链霉亲和素结合;细胞...
本文以案例为基础,详细介绍了DNA pull down实验的流程,包括实验所需的仪器试剂、实验方法及实验结果,仅供参考。 试剂和耗材样品: 采用PCR制备探针 引物序列:F:5' CTATCCGGCCCAAGCTTT 3'R:5' AATAATTCACCTTGGTGTAAC 3'(728 bp) PCR反应体系如下: ...
(1)对照管和实验管均加入100µL Elution buffer,混匀后沸水浴8-10min,置于磁力架上静置2min,取上清到新的EP管中,即为pull down产物,标记为对照组和实验组,2管各加入20µL 6× Loading buffer,沸水浴8-10min; (2)预留Input组的l00µL裂解液,也加入20µL 6X Loading buffer,沸水浴8-10min; ...
DNA pull-down实验是通过设计特异性DNA探针，利用生物素标记并结合链霉亲和素磁珠，将目标蛋白质与靶DNA片段结合的实验技术。实验流程主要包括探针设计与标记、Pull down操作和蛋白质检测三个关键步骤。探针设计与标记：首先，使用基因组DNA为模板，通过PCR扩增启动子片段，将其克隆至载体并进行序列鉴定。随后...
DNA pull-down以感兴趣的DNA序列为中心,寻找与该序列结合的蛋白质,最常见的应用是寻找某特定基因启动子区域的转录因子。更多实验相关:http://www.zoonbio.com/molecular/dna-pull-down-anli.html, 视频播放量 1198、弹幕量 0、点赞数 9、投硬币枚数 3、收藏人数 14、转发