用RT PCR从CVB3 感染细胞中扩增出VP1 片段,重组入真核表达质粒pcDNA3 中,转化大肠杆菌C600,扩增后的质粒经CsCl 密度梯度离心纯化,体外转染COS 7 细胞,用SDS PAGE和Western blotting 检测表达产物;并经胫骨前肌注射小鼠,每鼠100μg/ 次,隔4 周加强一次,共3 次.免疫后不同时间检测抗体,淋巴细胞增殖反应等免疫...
以之通过肌肉注射免疫BALB/ c 小鼠后, 检测其体内诱生的特异性体液免疫和细胞免疫应答, 并观察了其对致死剂量 CVB3 攻击的保护作用。 1 材料和方法 1. 1 材料 Hela、Sp2/ 0 细胞系均由本系保存。CVB3 毒株、 VP1 2372249 13 肽由中山医院卫生部病毒性心脏病重点实验室杨英珍教授惠赠。VP1 1215 肽由德国 ...
中文摘要CVB3VPl蛋白与重组腺病毒及重组质粒联合应用的免疫效果摘要目的:柯萨奇病毒B组3型(CoxsackievirusgroupBtype3CVB3)感染所致的病毒性心肌炎严重危害人类健康,也是新生儿猝死的重要原因,迄今尚无有效的预防方法。VPl是CVB3的主要衣壳蛋白,可诱导机体产生免疫应答。研究表明,编码VPl的DNA疫苗能诱导小鼠产生体液和细胞...
CVB3特异性体液和细胞免疫应答.间隔4 wk以5×LD50的CVB3攻击小鼠, 观察攻击后小鼠的存活情况.结果: 构建了重组质粒pcDNA3-VP1, 并在体外获得有效表达.以该质粒肌肉免疫BALB/c小鼠, 可诱生高水平的IgM和IgG, VP1多肽特异性淋巴细胞增殖反应及CTL活性均显著高于pcDNA3免疫的对照组.病毒攻击试验表明, pcDNA3-VP1...
CVB3-VP1基因与IL-15双表达质粒的构建
故本研究引入长度为10、15、19个由G和S组成的Linker来构建表达MDC与CVB3VP1融合蛋白核酸疫苗。 方法:(1)用PCR方法分别扩增出带Linker的MDC-L15(用于构建Linker长度为15个氨基酸的融合蛋白)、MDC-L19(用于构建Linker长度为19个氨基酸的融合蛋白)、L15-VP1(用于构建Linker长度为15个氨基酸的融合蛋白)和L19-VP1(用于...
Linker长度对MDC和CVB3VP1融合基因疫苗免疫效果的影响 据资料显示10-22个氨基酸效果较好。故本研究引入长度为10、15、19个由G和S组成的Linker来构建表达MDC与CVB3VP1融合蛋白核酸疫苗。 方法:(1)用PCR方法分别扩增出... 韩小艳 - 《河北医科大学》 被引量: 2发表: 2007年 IL—15基因真核表达质粒的构建及其对...
VP1环肽免疫小鼠可诱生较强的免疫应答和产生高效价的抗体,为新型疫苗的分子设计和预防CVB3的感染提供一种有效的多肽疫苗,预防CVB3诱导的病毒性心肌炎。结果:通过intein环化载体我们可以使VP1蛋白的环化效率达到100%,将纯化得到的VP1环肽疫苗通过肌肉注射免疫小鼠。结果显示,VP1环肽疫苗在诱生CVB3特异性血清IgG的水平,CVB3...
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1. CVB3-VP1基因与IL-15双表达质粒的构建 2. CVB3腺病毒载体疫苗Ad/VP1的构建及免疫小鼠的效果 3. 仙台病毒HN基因真核表达质粒对幼鼠免疫效果的评价 4. 融合基因DNA疫苗STxB-VP1和MDC-VP1对CVB3的免疫效果研究 5. 定向基因传递载体pET15b-Z-VP1的构建 6. 霍乱弧菌ctxB基因真核重组质粒的构建及表达...