中文摘要CVB3VPl蛋白与重组腺病毒及重组质粒联合应用的免疫效果摘要目的:柯萨奇病毒B组3型(CoxsackievirusgroupBtype3CVB3)感染所致的病毒性心肌炎严重危害人类健康,也是新生儿猝死的重要原因,迄今尚无有效的预防方法。VPl是CVB3的主要衣壳蛋白,可诱导机体产生免疫应答。研究表明,编码VPl的DNA疫苗能诱导小鼠产生体液和细胞...
体外转染COS 7 细胞,用SDS PAGE和Western blotting 检测表达产物;并经胫骨前肌注射小鼠,每鼠100μg/ 次,隔4 周加强一次,共3 次.免疫后不同时间检测抗体,淋巴细胞增殖反应等免疫指标.结果显示重组质粒体外转染真核细胞表达VP1 蛋白,免疫小鼠后产生了特异性抗体和淋巴细胞增殖反应.表明CVB3 VP1 DNA疫苗获得初步有效...
http://.paper.edu-1-中国科技论文在线ProteinCyclizationEnhancedThermostabilityandExopeptidase-ResistanceofCVB3capsidproteinVP1#HuJingpi..
本室构建了MDC ( macrophage-derived chemokine, MDC )与CVB3VP1融合基因质粒,保护率有一定的提高,但不能达到实用程度。推测可能是融合蛋白中某一成分或两种成分发生空间结构的不利变化,影响与APCs结合和/或VP1蛋白的免疫原性。如何保证融合蛋白的稳定性和生物学活性是本研究探讨的问题。 接头序列(Linker)的介入是...
目的: 构建表达柯萨奇病毒B3(CVB3)主要包膜蛋白VP1的基因疫苗, 并研究该疫苗诱导CVB3特异性免疫应答及免疫保护的作用.方法: 抽提CVB3 RNA, 以RT-PCR扩增VP1基因, 克隆于真核表达载体pcDNA3中, 构建质粒pcDNA3-VP1.将该质粒转染Hela细胞, 观察其表达情况; 以50 μg pcDNA3-VP1质粒DNA肌注免疫BALB/c小鼠3次, ...
为了验证miR-19a/19b通过靶向预测的3dpol编码序列促进CVB3生物合成的作用,研究人员使用pHA-3Dpol转染HeLa细胞,然后转染miR-19a/19b mimic,24 h后检测3Dpol的表达。结果发现,miR-19a/19b mimic在mRNA和蛋白质水平下均显著提高了3Dpol的表达;而对另一种病毒蛋白VP1的表达没有显著影响,进一步支持了miR-19a/19b选择...
摘要: 篇首: IL-15做为佐剂,可增强抗原的提呈和刺激免疫细胞的分化,CVB3的VP1蛋白可以刺激机体产生具有保护性的中和抗体.我们通过构建pcDNA3-VP1/IL-15真核双表达重组质粒并观察其免疫效果而探讨预防病毒性心肌炎的可能性.关键词:CVB3 VP1 IL-15基因 真核双表达质粒 免疫效果 ...
结果:通过intein环化载体我们可以使VP1蛋白的环化效率达到100%,将纯化得到的VP1环肽疫苗通过肌肉注射免疫小鼠。结果显示,VP1环肽疫苗在诱生CVB3特异性血清IgG的水平,CVB3特异性淋巴细胞增殖、杀伤以及IFN-γ+T细胞免疫应答方面都显著高于VP1线性多肽疫苗,表明VP1环肽疫苗可以引起较强的体液和细胞免疫应答。以诱导心肌炎剂量...
从ncbi下载coxsackievirusb3的基因组全序列(genbank:idm33854.1),vp1蛋白位置818-1101,vp1蛋白的序列如seqid5所示。通过smart网站分析确定病毒的rhv结构域的蛋白位置为849-1017,经过优选,得到上述引物coxsackievirusb3-f和coxsackievirusb3-r。 在优选引物条件下,所扩增出的目的片段如seqid3所示,具体为:...