CUT&Tag-qPCR方案目前做CUT&Tag-qPCR时，有两种，一种是蛋白酶K消化和gDNA提取后直接qPCR实验，一种是完成建库后进行qPCR。这两种方式都有文献可参考。目前翌圣更推荐完成建库后进行qPCR实验。qPCR 定量检测 qPCR试剂以翌圣的Hieff UNICON® Universal Blue qPCR SYBR Green Master Mix（Cat#11184）为例。反应体系...
Percent Input法需要引入CUT&Tag实验流程并不需要的Input,因此不适用于CUT&Tag-qPCR的实验结果计算。Fold Enrichiment法引入了IgG,IgG理论上是不能特异性富集任何DNA片段,因此IgG可以作为阴性对照参与计算富集倍率,这不仅能够用于对照组和处理组相对富集倍率的计算,也能够满足单组单基因的富集验证,计算方法与常规qPCR类似...
目前做CUT&Tag-qPCR时,有两种,一种是蛋白酶K消化和gDNA提取后直接qPCR实验,一种是完成建库后进行qPCR。这两种方式都有文献可参考。目前翌圣更推荐完成建库后进行qPCR实验。 qPCR 定量检测 qPCR试剂以翌圣的Hieff UNICON® Universal Blue qPCR SYBR Green Master Mix(Cat#11184)为例。 反应体系(推荐冰上配制) ...
在CUT&Tag实验中,作者发现GhS4G20是GhLYI的一个靶基因,并且通过Y1H(A)、EMSA(B)、Dual-LUC(C)以及RT-qPCR(D)实验证实GhLYI可以直接结合到SAG20的启动子上并诱导它的表达。 pCUT&Tag 利用CUT&Tag进行转录因子结合位点鉴定时需要获得稳定的转基因材料,而获得稳定的转基因材料往往是费时的,因此基于原生质体体系...
CUT&Tag-qPCR方案 目前做CUT&Tag-qPCR时,有两种,一种是蛋白酶K消化和gDNA提取后直接qPCR实验,一种是完成建库后进行qPCR。这两种方式都有文献可参考。目前翌圣更推荐完成建库后进行qPCR实验。 qPCR 定量检测 qPCR试剂以翌圣的Hieff UNICON® Universal Blue qPCR SYBR Green Master Mix(Cat#11184)为例。
CUT&RUN qPCR实验操作演示(HD101) 09:05 ELISA 实验注意事项 02:41 A112 TUNEL细胞凋亡检测(细胞爬片样本)实验操作演示 05:09 Western Blot(蛋白质印迹法,WB)实验操作演示 10:42 A112 TUNEL细胞凋亡检测(石蜡切片样本)实验操作演示 05:05 CUT & Tag 实验注意事项 03:06 CUT&Tag实验操作演示(TD903...
一:CUT&Tag实验结果进行qPCR分析 CUT&Tag实验所获取的DNA片段可以进行qPCR以检测目的条带的富集情况。CUT&Tag-qPCR与ChIP-qPCR类似,定量的长度、方法、引物设计等几乎完全一致。一般的实验流程为:细胞与磁珠结合—一抗孵育—二抗孵育—转座体孵育—片段化—DNA提取—qPCR检测。整个实验流程不超过10小时。
图:使用试剂盒中的spike in 2进行normalization处理,同一基因在不同投入量细胞结果中,基因的高集倍率差异不大。 图:使用试剂盒中的spikein 3进行normalization处理,同一基因在不同投入量细胞结果中,基因的富集倍率差异不大。 更多关于CUT&Tag-qPCR实验流程,可联系翌圣获取。
一:CUT&Tag实验结果进行qPCR分析 CUT&Tag实验所获取的DNA片段可以进行qPCR以检测目的条带的富集情况。CUT&Tag-qPCR与ChIP-qPCR类似,定量的长度、方法、引物设计等几乎*一致。一般的实验流程为:细胞与磁珠结合—一抗孵育—二抗孵育—转座体孵育—片段化—DNA提取—qPCR检测。整个实验流程不超过10小时。
一:CUT&Tag实验结果进行qPCR分析 CUT&Tag实验所获取的DNA片段可以进行qPCR以检测目的条带的富集情况。CUT&Tag-qPCR与ChIP-qPCR类似,定量的长度、方法、引物设计等几乎完全一致。一般的实验流程为:细胞与磁珠结合—一抗孵育—二抗孵育—转座体孵育—片段化—DNA提取—qPCR检测。整个实验流程不超过10小时。