cut run是一种新近发展的染色质免疫共沉淀技术,其原理是通过特异性抗体识别靶标蛋白,并利用酶切作用将其与染色质分离,然后使用qPCR来定量分析目标基因的丰度。在cut run实验中,引物的设计是确保实验成功的关键。 在进行cut run实验前,需要确定目标基因的序列。这可以通过数据库查询或测序技术来获取。在得到目标基因...
qPCR 定量检测 qPCR试剂以翌圣的Hieff UNICON® Universal Blue qPCR SYBR Green Master Mix（Cat#11184）为例。反应体系（推荐冰上配制）【注】使用前务必充分混匀，避免剧烈震荡产生过多气泡。a) 引物浓度：通常引物终浓度为0.2 μM，也可以根据情况在0.1-1.0 μM之间进行调整。b) 模板浓度：如模板类型为...
目前翌圣更推荐完成建库后进行qPCR实验。 qPCR 定量检测 qPCR试剂以翌圣的Hieff UNICON® Universal Blue qPCR SYBR Green Master Mix(Cat#11184)为例。 反应体系(推荐冰上配制) 【注】 使用前务必充分混匀,避免剧烈震荡产生过多气泡。 a)引物浓度:通常引物终浓度为0.2 μM,也可以根据情况在0.1-1.0 μM之间进...
LncRNA的qPCR引物相⽐于编码基因,是要复杂。导致其复杂的原因并不是引物设计原则上有特别之处,⽽是在于有太多的LncRNA数据库,数 据库之间往往没有关联,且不同数据库的维护也不尽相同。今天的⽂章分两块:LncRNA数据库介绍和LncRNA引物设计注意事项。 LncRNA数据库介绍 1、NCBI RefSeq NCBI不多做介绍,通常...
2245 -- 9:05 App CUT&RUN qPCR实验操作演示(HD101) 6704 -- 6:00 App A211 Annexin V-FITC PI凋亡检测实验操作演示 9395 2 37:18 App 科研干货 | qPCR引物设计实战课 3909 1 1:14:36 App RNA提取及建库解决方案 9092 -- 33:48 App RNA提取与纯化 9576 -- 5:05 App A112 TUNEL细胞凋...
qPCR 定量检测 qPCR试剂以翌圣的Hieff UNICON® Universal Blue qPCR SYBR Green Master Mix(Cat#11184)为例。 反应体系(推荐冰上配制) 【注】使用前务必充分混匀,避免剧烈震荡产生过多气泡。a)引物浓度:通常引物终浓度为0.2 μM,也可以根据情况在0.1-1.0 μM之间进行调整。b)模板浓度:如模板类型为未稀释cDNA...
3.2万 83 40:59 App 如何设计荧光定量qPCR引物 17.6万 181 16:06 App 实时荧光定量PCR-数据分析讲解 3319 1 18:57 App 自私的基因,其實我們都被基因利用了 老高與小茉 Mr & Mrs Gao 3.4万 145 7:28 App 老高与小茉💘近亲结婚的真相:你不知道的可怕后果!『无尾音助眠』 1334 -- 2:10:48 App 《...
事实证明,CUT&Tag实验所获取的DNA片段可以进行qPCR以检测目的条带的富集情况。CUT&Tag-qPCR与ChIP-qPCR类似,定量的长度、方法、引物设计等几乎完全一致。一般的实验流程为:细胞与磁珠结合—一抗孵育—二抗孵育—转座体孵育—片段化—DNA提取—qPCR检测。整个实验流程不超过10小时。
一:CUT&Tag实验结果进行qPCR分析 CUT&Tag实验所获取的DNA片段可以进行qPCR以检测目的条带的富集情况。CUT&Tag-qPCR与ChIP-qPCR类似,定量的长度、方法、引物设计等几乎完全一致。一般的实验流程为:细胞与磁珠结合—一抗孵育—二抗孵育—转座体孵育—片段化—DNA提取—qPCR检测。整个实验流程不超过10小时。
CUT&Tag Pro试剂盒(Vazyme #TD904)在不同细胞投入量的293细胞中对组蛋白H3K4me3体系进行了CUT&Tag-qPCR实验,本试剂盒可兼容100 - 100,000细胞,在低细胞投入量下仍有良好表现。对于不同丰度的靶点我们也对多个目的基因设计了引物进行检测,相较于阴性对照IgG,实验组中目的基因均有显著富集。