基因编辑（Gene editing），是一种新兴的比较精确的能对生物体基因组特定目标基因进行修饰的一种基因工程技术。基因编辑能够高效率地进行定点基因组编辑，故而在基因研究、基因治疗和基因育种等方面展示出了巨大的应用前景。迄今为止，CRISPR/Cas9作为一种高效的基因编辑工具，广泛应用于科学界。基因编辑是一种对基因组...
[4] Li Y, Zhou S, Wu Q, Gong C. CRISPR/Cas gene editing and delivery systems for cancer therapy. WIREs Nanomed Nanobiotechnol, 2024, 16:e1938.
[2] More than 200 people have been treated with experimental CRISPR therapies. Retrieved November 9, 2023, from https://www.technologyreview.com/2023/03/10/1069619/more-than-200-people-treated-with-experimental-crispr-therapies/ [3] Frangoul et al., (2020). CRISPR-Cas9 Gene Editing for Sic...
在细菌及古细菌中，CRISPR 系统共分成 3 类，其中 I 类和 Ⅲ 类需要多种 CRISPR 相关蛋白 (Cas 蛋白) 共同发挥作用。而来自 Streptococcus pyogenes 的 Ⅱ 型系统只需要一种 Cas 蛋白 (Cas9) 即可发挥核酸内切酶活性。因此，CRISPR/Cas9 系统应用最为广泛。CRISPR/Cas9 系统已经成功应用于植物、细菌、酵母、鱼类...
Engineering the next-generation of CAR T-cells with CRISPR-Cas9 gene editing. Mol Cancer. 2022;21(1):78. Huang S, Yan Y, Su F, et al. Research progress in gene editing technology. Front Biosci (Landmark Ed). 2021;26(10):916-927. Li T, Yang Y, Qi H, et al. CRISPR/Cas9 the...
[2] More than 200 people have been treated with experimental CRISPR therapies. Retrieved November 9, 2023, from https://www.technologyreview.com/2023/03/10/1069619/more-than-200-people-treated-with-experimental-crispr-therapies/ [3] Frangoul et al., (2020). CRISPR-Cas9 Gene Editing for Sic...
基因编辑技术 (genome editing) 可以精确地破坏、插入或替换基因组中特定位点的 DNA 序列, 在基因功能的研究和遗传疾病的治疗中发挥着巨大的作用。人工核酸内切酶 (engineered endonuclease, EEN) 介导的基因编辑技术极大地改善了早期基于同源重组的基因打靶技术 (gene targeting) 效率低的问题, 使得科研工作者可以高效地...
Lentivirus pre-packed with Cas9 protein for safer gene editing. Gene Ther. 2016 Apr 07 [PMID:27052803] (antibody use: ICC/IF) Chu VT, Weber T, Graf R et al. Efficient generation of Rosa26 knock-in mice using CRISPR/Cas9 in C57BL/6 zygotes. BMC Biotechnol. 2016 Jan 16 [PMID:...
Shan Q, Wang Y, Li J, Gao C. 2014. Genome editing in rice and wheat using the CRISPR/Cas system. Nature Protocols, 9(10): 2395-2410 Wang K, Shi L, Liang X, Zhao P, Wang W, Liu J, Chang Y, Hiei Y,...
在基因编辑技术的CRISPR/Cas体系中，基于同源介导修复 (homology directed repair, HDR) 机制开展的基因敲入是其重要应用之一，合适的HDR模板是决定基因敲入成败与效率的重要因素。三、CRISPR基因敲入实验流程步骤 （以敲入RFP蛋白为例）1. 构建sgRNA-Cas9质粒及修复DNA模板质粒 （1）确定敲入位点 ①若敲入的片段不参与...