•基因组编辑技术(genomeediting)是一种可以在基因组水平上对DNA序列进行改造的遗传操作技术。也称为基因打靶(Genetargeting)。•技术的原理是构建一个人工内切酶,在预定的基因组位置切断DNA,切断的DNA在被细胞内的DNA修复系统修复过程中会产生突变,从而达到定点改造基因组的目的。5 基因组编辑技术 历史 1993年...
gene),这些基因编码的蛋白具有核酸酶活性的功能域,可以对DNA序 列进行特异性的切割 CRISPR-Cas9:FromYogurttoGenomeEditing ►在1987年,日本人在大肠杆菌中发现有串联间隔重复序列 ►2005年,鉴定出间隔区的外源基因,提出这是细菌对抗噬菌体的一种适应 性免疫应答防御机制 ►2007年,DANISCO公司的一名科学家...
(CRISPR RNA) fused to a tracrRNA and Cas9 endonuclease that recognize specific sequences to the base pair Feasibility Difficult: -Need a customized protein for each gene sequence -Low delivery efficiency Easy: - all-in-one gRNA-Cas9 vector system - multi gene editing is feasible Reference ...
Conclusions:Faster,Better,Cheaper 1疾病基因修复、1疾病造模Nogoodantibody?---Cas9help!–VP64CRISPR/Cas系统:CRISPR/Cas9systemofRNA-guidedgenomeeditingisrevolutionizinggeneticsresearchinawidespectrumoforganisms.2)Givefunction:提高基因的表达CRISPR/Cas9基因敲除ConditionalGeneKnockout •CRISPRlabeling(CRISPR-l)
(ZFNS一个靶点成本6000$)CRISPR/Cas9系统的优势操作简单,靶向精确性更高。CRISPR/Cas9系统的评价CRISPR/Cas9系统的评价参考文献:[1]Y.Ishino,H.Shinagawa,K.Makino,M.Amemura,A.Nakata,Nucleotidesequenceoftheiapgene,responsibleforalkalinephosphataseisozymeconversioninEscherichiacoli,andidentificationofthegeneproduct....
sgRNA靶向序列和基因组序列必须完全匹配,Cas9才会对DNA进行剪切。编码sgRNA 的序列不超过100bp,因此比构建TALENs和ZENs更简单方便,用于CRISPR的sgRNA识别序列仅需20个核苷酸。 CRISPR/Cas9系统是由RNA调控的对DNA的修饰,其基因修饰可遗传。 基因修饰率高,CRISPRs基因敲入的效率为51%-79%,TALENs的效率为0%-34%。
CRISPR基因编辑技术详解.ppt,CRISPR/Cas 9系统的优势 操作简单,靶向精确性更高。sgRNA靶向序列和基因组序列必须完全匹配,Cas9才会对DNA进行剪切。编码sgRNA 的序列不超过100bp,因此比构建TALENs和ZENs更简单方便,用于CRISPR的sgRNA识别序列仅需20个核苷酸。 CRISPR/Cas9
Cas9、RNaseIII加工pre-crRNA,形成成熟的crRNA►crRNA、tracrRNA、Cas9形成复合体BiologyofthetypeII-ACRISP7BiologyofthetypeII-ACRISPR-Cassystem►PAM:ProtospacerAdjacentMotif,CRISPR-Cas剪切位点►RuvC:Cas9中的活性剪切位点,剪切非互补链►HNH:Cas9中的活性剪切位点,剪切与crRNA互补的DNA链BiologyofthetypeII-...
CRISPRCas9ppt 简介 •CRISPR/Cas(clusteredregularlyinterspacedshortpalindromicrepeatsassociated(Cas))系统广泛存在于细菌及古生菌中,是机体长期进化形成的RNA指导的降解入侵病毒或噬菌体DNA的适应性免疫系统。基于细菌的这种免疫功能,人们把Ⅱ型CRISPR-Cas系统改造成一种全新的人工核酸内切酶,从而使该系统能够对靶基因...
ApplicationofCRISPR-Cas9 04CRISPR-Cas9前景 ProspectsofCRISPR-Cas9 基因编辑技术 基因编辑(geneediting):是指对基因组进行定点修饰的一项新技术,可以精确地定位到基因组的某一位点上,在这位点上可以进行特定DNA片段的插入,缺失,修改和替换 基因定点修饰是研究基因功能及人类遗传性疾病治疗的重要手段 定向编辑分子...