而且与限制酶相似，能识别特异的DNA序列，即loxP位点，使loxP位点间的基因序列被删除或重组。LoxP序列 locus of X (cross)-over in P1)，是位于P1噬菌体中长度为34bp的一段序列，由两个13bp的反向回文序列和8bp的中间间隔序列共同组成，反向回文序列是Cre重组酶的识别和结合区域，间隔序列决定LoxP序列的方向。l...
loxP序列由位于两端区域的方向重复序列和中间区域的8个碱基对共同组成。Cre-loxP系统通常需要培养两类转基因小鼠。以mTmG模型小鼠为例,研究人员要在第一组小鼠(无Cre酶基因)的一对同源染色体上均添加pCA序列(启动子)、mT(红色荧光蛋白基因)、mG(绿色荧光蛋白)和pA序列(基因表达终止),并且在mT和pA的两端分别插入一...
Cre-loxP 系统能够实现特定基因的敲除,该系统中的Cre酶可识别DNA 分子中特定的loxP序列,当DNA 分子上存在两个同向loxP序列时,Cre酶可将两个loxP 序列之间的DNA 序列剪除,切口连接形成的环化产物被降解,从而达到敲除特定基因的目的,如图1所示。科学家把几种荧光蛋白基因和Cre酶能识别并切割的序列(loxP1和loxP 2)...
一般而言，当细胞基因组内存在两个LoxP位点时，Cre重组酶会诱导两个LoxP位点间的序列发生重组。重组的结果取决于两个LoxP位点的方向，主要有以下几种可能： 1、如果两个LoxP位点位于一条DNA链上，但方向相反，Cre重组酶能导致两个LoxP位点间的序列翻转；2、如果两个LoxP位点位于一条DNA链上，并且方向相同，Cre重组...
科学家把几种荧光蛋白基因和Cre酶能识别并切割的序列(loxP1和loxP2)串在一起,构建如图2所示的表达载体T,在Cre酶的作用下,一部分荧光蛋白基因会被随机地“剪掉”,而剩下的部分得以表达,这样就可以随机呈现不同的颜色。这种利用荧光蛋白“点亮”神经元的大脑成像技术被称为“脑彩虹”,能帮助科学家了解大脑。 (1...
1981年,Nat Sternberg等报道了一种克隆自大肠杆菌P1噬菌体的蛋白——由343个氨基酸编码,38kDa的Cre(Cyclization Recombination Enzyme)重组酶,它能特异识别loxP位点,并介导loxP位点间的序列删除或重组。loxP(locus of X-overP1)位点长为34bp,包括两个13bp的反向重复序列和一个8bp的间隔区域。其中,反向重复序列是Cre...
Cre-loxP是一种常用的基因改造工具,Cre基因的表达产物是Cre酶,loxP是一段DNA序列。当Cre酶遇到两段loxP序列时,能将两段loxP序列中间的序列删除。甲为Cre基因的杂合个体(全身各细胞均表达Cre基因),乙是含外源基因D的纯合个体(D基因两端带有loxP序列),两种基因在染色体上的分布如图所示。现将甲乙杂交,得到的F1自由交...
Cre酶的独特之处在于其催化活性，类似于限制酶，能识别并作用于特定的DNA序列——loxP位点，实现基因片段的删除或重组。Cre酶表现出高达70%的重组效率，无需辅助因子，可以适应多种DNA结构，包括线形、环状甚至超螺旋形态。LoxP序列则源于P1噬菌体，由两个13bp的反向重复序列和中间8bp间隔序列共同构成，...
1、Cre-loxP重组酶系统:Cre重组酶识别loxP位点两端的反向重复序列并结合形成二聚体,然后此二聚体与另一个loxP位点上的二聚体结合形成一个四聚体。loxP位点是有方向性的,四聚体连接的两个位点在方向上是平行的。然后两个loxP位点间的DNA序列被Cre重组酶切断。接着,DNA连接酶快速高效地将这些链连接起来。 2、Cre...
Cre-loxp系统是一种基因编辑技术,它包含两个重要成员:Cre重组酶和loxP序列。 Cre重组酶是一种由343个氨基酸组成的单体蛋白,可以引发loxP位点之间的DNA序列重组。 LoxP序列是由两个13bp反向重复序列和中间间隔的8bp序列共同组成,8bp的间隔序列决定了LoxP的方向。