而且与限制酶相似,能识别特异的DNA序列,即loxP位点,使loxP位点间的基因序列被删除或重组。LoxP序列 locus of X (cross)-over in P1),是位于P1噬菌体中长度为34bp的一段序列,由两个13bp的反向回文序列和8bp的中间间隔序列共同组成,反向回文序列是Cre重组酶的识别和结合区域,间隔序列决定LoxP序列的方向。
loxP序列由位于两端区域的方向重复序列和中间区域的8个碱基对共同组成。Cre-loxP系统通常需要培养两类转基因小鼠。以mTmG模型小鼠为例,研究人员要在第一组小鼠(无Cre酶基因)的一对同源染色体上均添加pCA序列(启动子)、mT(红色荧光蛋白基因)、mG(绿色荧光蛋白)和pA序列(基因表达终止),并且在mT和pA的两端分别插入一...
一般而言,当细胞基因组内存在两个LoxP位点时,Cre重组酶会诱导两个LoxP位点间的序列发生重组。重组的结果取决于两个LoxP位点的方向,主要有以下几种可能: 1、如果两个LoxP位点位于一条DNA链上,但方向相反,Cre重组酶能导致两个LoxP位点间的序列翻转;2、如果两个LoxP位点位于一条DNA链上,并且方向相同,Cre重组...
Cre-loxP系统由Cre酶和loxP序列两部分组成,Cre酶作用能实现特定基因的敲除(如图1),图中箭头表示Cre酶的作用位点。利用基因工程技术培育抗虫抗除草剂水稻可减少因虫害(啃食叶片)和草害造成的稻米产量损失,为了增强食品安全性,科研人员利用Cre-loxP系统和组织特异性启动子P3驱动Cre酶基因在胚乳中特异性表达,从而培育出...
1981年,Nat Sternberg等报道了一种克隆自大肠杆菌P1噬菌体的蛋白——由343个氨基酸编码,38kDa的Cre(Cyclization Recombination Enzyme)重组酶,它能特异识别loxP位点,并介导loxP位点间的序列删除或重组。loxP(locus of X-overP1)位点长为34bp,包括两个13bp的反向重复序列和一个8bp的间隔区域。其中,反向重复序列是Cre...
Cre-loxp系统是一种基因编辑技术,它包含两个重要成员:Cre重组酶和loxP序列。 Cre重组酶是一种由343个氨基酸组成的单体蛋白,可以引发loxP位点之间的DNA序列重组。 LoxP序列是由两个13bp反向重复序列和中间间隔的8bp序列共同组成,8bp的间隔序列决定了LoxP的方向。
Cre-loxP是一种常用的基因改造工具,Cre基因的表达产物是Cre酶,loxP是一段DNA序列。当Cre酶遇到两段loxP序列时,能将两段loxP序列中间的序列删除。甲为Cre基因的杂合个体(全身各细胞均表达Cre基因),乙是含外源基因D的纯合个体(D基因两端带有loxP序列),两种基因在染色体上的分布如图所示。现将甲乙杂交,得到的F1自由交...
Cre酶的独特之处在于其催化活性,类似于限制酶,能识别并作用于特定的DNA序列——loxP位点,实现基因片段的删除或重组。Cre酶表现出高达70%的重组效率,无需辅助因子,可以适应多种DNA结构,包括线形、环状甚至超螺旋形态。LoxP序列则源于P1噬菌体,由两个13bp的反向重复序列和中间8bp间隔序列共同构成,...
Cre-lox重组是一种用于细胞DNA的特定位点上的特异性重组酶技术,其特点在于可以对指定的特定细胞群进行DNA修改。该技术使用Cre重组酶对loxP序列(由反向重复序列
loxP序列由位于两端区域的方向重复序列和中间区域的8个碱基对共同组成。Cre-loxP系统通常需要培养两类转基因小鼠。以mTmG模型小鼠为例,研究人员要在第一组小鼠(无Cre酶基因)的一对同源染色体上均添加pCA序列(启动子)、mT(红色荧光蛋白基因)、mG(绿色荧光蛋白)和pA序列(基因表达终止),并且在mT和pA的两端分别插入一...