Cre-loxP 主要用于基因敲除，但它也会根据 loxP 位点的取向和位置诱导两个 loxP 位点之间的 DNA 反转和易位[1]。2常用的 Cre-loxP 诱变系统 图 2. Cre-loxP 诱变系统的原理[1]。 ▐ Cre-ER (Tam) 系统Cre-ER (Tam) 系统，也称为他莫昔芬 (Tamoxifen) 诱导的 Cre 系统，是 Cre-LoxP 系统中最为...
图5. Cre-loxP 基因敲除小鼠一般育种原则[1]。 ▐ 诱导方法 药物 方法 Tamoxifen Adult PdgfbNull-MG mice; 75 mg/kg Tamoxifen (dissolved in corn oil) intraperitoneal injection (i.p.) for 5 consecutive days[3]. Hif1af/f; Foxl2-CreERT2 female mice (3 weeks); 100 mg/kg Tamoxifen (fresh...
重组腺相关病毒载体(AAV)介导的Cre-loxP系统很好的解决了上述问题,将目的元件包括启动子和增强子,以及内含子、微小 RNA 识别序列和内部核糖体进入位点(IRES或2A),重组酶(Cre、CreER、Flp 或 FlpER),翻译后调控元件,如 WPRE 或 3'-UTR等,构建出特异性组织或者细胞表达的Cre工具鼠(Leila Haery et al., Front ...
1981年,Nat Sternberg等报道了一种克隆自大肠杆菌P1噬菌体的蛋白——由343个氨基酸编码,38kDa的Cre(Cyclization Recombination Enzyme)重组酶,它能特异识别loxP位点,并介导loxP位点间的序列删除或重组。loxP(locus of X-overP1)位点长为34bp,包括两...
Cre-LoxP 系统是一种基于位点特异性重组的基因编辑技术,由 Cre 重组酶和 LoxP 位点两部分组成。 图1. Cre-loxP system[1]。 Cre 重组酶(Cyclization Recombination Enzyme) 由噬菌体 P1 的环化重组酶基因产生的一个 38 kDa 的 DNA 重组酶,可以识别 loxP (locus of x-over, P1) 位点的特定 DNA 片段序列,...
图5. Cre-loxP 基因敲除小鼠一般育种原则[1]。 ▐ 诱导方法 药物方法 Tamoxifen(详情:http//www.medchemexpress.cn/Tamoxifen.html) Adult PdgfbNull-MG mice; 75 mg/kg Tamoxifen (dissolved in corn oil) intraperitoneal injection (i.p.) for 5 consecutive days[3]. ...
图5. Cre-loxP 基因敲除小鼠一般育种原则[1]。 ▐ 诱导方法 药物方法 Tamoxifen(详情:http//www.medchemexpress.cn/Tamoxifen.html) Adult PdgfbNull-MG mice; 75 mg/kg Tamoxifen (dissolved in corn oil) intraperitoneal injection (i.p.) for 5 consecutive days[3]. ...
loxP是一段长34bp的DNA序列,是重组酶识别的位点,被称为loxP位点(10cus of X—over in P1)。 locus of X-over P1来源于噬菌体P1,包括两个13bp的反向重复序列和一个不对称的8bp间隔区组成。反向重复序列是Cre重组酶的特异识别位点,而间隔区域决定了loxP位点的方向。
2. Flox小鼠:携带目标基因两侧插入了loxP位点的转基因小鼠(Flox是“flanked by loxP”的缩写)。这些loxP位点为Cre酶的作用提供靶标。loxP位点本身不会影响目标基因的功能,目标基因可以正常表达。 图1:loxP位点及其突变体位点 02 Cre/loxP系统的工作原理
Cre和loxP是什么 1981年,Nat Sternberg等报道了一种克隆自大肠杆菌P1噬菌体的蛋白——由343个氨基酸编码,38kDa的Cre(Cyclization Recombination Enzyme)重组酶,它能特异识别loxP位点,并介导loxP位点间的序列删除或重组。loxP(locus of X-overP1)位点长为34bp,包括两个13bp的反向重复序列和一个8bp的间隔区域。其中,...