研究人员在转基因小鼠Oxtrflox/flox[催产素受体(OxtR)基因的特定外显子两侧被插入了同向的LoxP位点]一侧SN注射病毒AAV-Cre-GFP,另一侧SN注射对照病毒AAV-GFP,通过Cre-LoxP系统实现单侧SN特异性敲除Oxtr的目的。在病毒注射后30天,通过蛋白质免疫印迹实验验证了敲除效率。 客户文章(IF=14.3):Wang, Yurong et al....
loxP 位点是一个 34 bp 的序列，由两个 13 bp 的反转和回文重复序列和 8 bp 的核心序列组成。Cre-loxP 主要用于基因敲除，但它也会根据 loxP 位点的取向和位置诱导两个 loxP 位点之间的 DNA 反转和易位[1]。2常用的 Cre-loxP 诱变系统 图 2. Cre-loxP 诱变系统的原理[1]。 ▐ Cre-ER (Tam) 系...
mT/mG(ROSA-pCA-loxp-mT-pA-loxp-mG-pA)鼠是一种双荧光报告鼠,这种鼠在正常情况下表达定位在膜上的红色荧光蛋白(TdTomato),而当细胞表达Cre后,则表达定位在膜上的绿色荧光蛋白(GFP)。 Alb为成年动物肝细胞特异性启动子,将rAAV2/8-Alb-Cre病毒尾静脉注射mT/mG小鼠,可发现特异性感染小鼠肝脏组织(绿色),而...
LSL策略应用mT/mG（ROSA-pCA-loxp-mT-pA-loxp-mG-pA）鼠是一种双荧光报告鼠，这种鼠在正常情况下表达定位在膜上的红色荧光蛋白（TdTomato），而当细胞表达Cre后，则表达定位在膜上的绿色荧光蛋白（GFP）。Alb为成年动物肝细胞特异性启动子，将rAAV2/8-Alb-Cre病毒尾静脉注射mT/mG小鼠，可发现特异性感染小鼠肝...
在cTRIO系统中通过在C脑区注射逆行标记的CAV2-DIO-Flp（现在更多使用效率更高的AAV2-retro-DIO-Flp）使得在B→C这个环路的神经元携带Flp重组酶，使得B脑区先前注射的AAV-FDIO-TVA-GFP和AAV-FDIO-RVG得以表达，最后通过注射RV-EnvA-ΔG-mCherry逆行标记到上游脑区的胞体，从而实现在Cre小鼠中对A→B→C三级...
1981年,Nat Sternberg等报道了一种克隆自大肠杆菌P1噬菌体的蛋白——由343个氨基酸编码,38kDa的Cre(Cyclization Recombination Enzyme)重组酶,它能特异识别loxP位点,并介导loxP位点间的序列删除或重组。loxP(locus of X-overP1)位点长为34bp,包括两...
mT/mG(ROSA-pCA-loxp-mT-pA-loxp-mG-pA)鼠是一种双荧光报告鼠,这种鼠在正常情况下表达定位在膜上的红色荧光蛋白(TdTomato),而当细胞表达Cre后,则表达定位在膜上的绿色荧光蛋白(GFP)。 Alb(血清蛋白)为肝实质细胞特异性启动子,将rAAV2/8-Alb-C...
图1. Cre-loxP system[1]。 Cre 重组酶(Cyclization Recombination Enzyme) 由噬菌体 P1 的环化重组酶基因产生的一个 38 kDa 的 DNA 重组酶,可以识别 loxP (locus of x-over, P1) 位点的特定 DNA 片段序列,并介导两个 loxP 位点之间 DNA 序列的位点特异性缺失。
即——SA—loxP—NeoR-3XpA—loxP—GFP—— SA前也可以加入外源性启动子或增强子(如CGA,CMV)来确保报告基因的表达效率。 Abbreviations: SA,剪切受体;NeoR-3XpA,新霉素抗性基因和3个聚腺苷酸,共同构成终止转录盒;GFP,绿色荧光蛋白,报告基因。 看文献时会发现很多类似于“Ai9;Ai14”的称呼,它们都属于报告基...
Cre和loxP是什么 1981年,Nat Sternberg等报道了一种克隆自大肠杆菌P1噬菌体的蛋白——由343个氨基酸编码,38kDa的Cre(Cyclization Recombination Enzyme)重组酶,它能特异识别loxP位点,并介导loxP位点间的序列删除或重组。loxP(locus of X-overP1)位点长为34bp,包括两个13bp的反向重复序列和一个8bp的间隔区域。其中,...