LoxP位点是噬菌体中长度为34bp的回文结构序列,具有方向性,LoxP的方向影响DNA重组的结果。目前已发现多种LoxP位点,均可被Cre酶识别。Cre-LoxP系统经常被用于化学遗传激活和基因敲除领域。 DIO-mCherry质粒是基于Cre重组酶活性报告质粒。该质粒包含CAG启动子、正向LoxP、正向LoxP 2272、反向mCherry、反向LoxP、反向LoxP 2...
Cre是一种在噬菌体中发现的重组酶,能够识别特异性位点(LoxP),使2个LoxP位点之间的DNA序列发生精确重组。LoxP位点是噬菌体中长度为34bp的回文结构序列,具有方向性,LoxP的方向影响DNA重组的结果。目前已发现多种LoxP位点,均可被Cre酶识别。Cre-LoxP系统经常被用于化学遗传激活和基因敲除领域。 DIO-mCherry质粒是基于Cr...
它不仅具有催化活性,而且与限制酶相似,能识别特异的DNA序列,即loxP位点,使loxP位点间的基因序列被删除...
另外也采用了lox66/71的非对称loxP序列以进一步降低质粒在细菌复制过程的自发重组,当然相比较于loxP和lox2272,Cre酶对lox66/71的重组效率也被降低。 Cre-loxP系统的应用 为什么可以用两种小鼠杂交还需要使用病毒呢? 这是因为相对于小鼠杂交,使用病毒...
Cre重组酶发现于噬菌体,能识别LoxP位点,进行精确DNA重组。LoxP位点,34bp回文结构,具有方向性,影响重组结果。多LoxP位点被Cre酶识别,应用于化学遗传激活与基因敲除。DIO-mCherry质粒基于Cre酶活性报告机制,包含CAG启动子、LoxP、反向mCherry、WPRE等结构。Cre作用下,反向mCherry序列翻转,正常翻译m...
写在前面,需要该系统质粒的可以私信小编。 Cre-loxp系统介绍: Cre/Loxp重组系统由Cre重组酶和Loxp位点两部分组成,Cre重组酶基因来源于大肠杆菌噬菌体P1,由343个氨基酸组成,具有催化活性,而且和限制性内切酶差不多,能够识别回文的DNA序列,叫做Loxp位点,从而介导基因重组。Loxp位点长34bp,loxp位点序列是:ATAACTTCGTATA-...
1.Cre重组酶和loxP位点 Cre重组酶(Cyclization Recombination Enzyme)由大肠杆菌噬菌体P1的Cre基因编码,是由343个氨基酸组成的38kD的蛋白质。它不仅具有催化活性,而且与限制酶相似,能够特异性识别loxP位点。 LoxP(locus of X-overP1)位点长为34bp,包括两个13bp的反向重复序列和一个8bp的间隔区域。其中,反向重复序列...
另外也采用了lox66/71的非对称loxP序列以进一步降低质粒在细菌复制过程的自发重组,当然相比较于loxP和lox2272,Cre酶对lox66/71的重组效率也被降低。 Cre-loxP系统的应用 为什么可以用两种小鼠杂交还需要使用病毒呢? 这是因为相对于小鼠杂交,使用病毒实现目的基因的OE/KD往往具有更短的实验周期和更低的实验成本。另外...
科学家尝试使用Cre/loxP位点特异性重组系统,在检测目的基因导入成功后,删除转基因烟草细胞内的抗除草剂基因.其技术过程如图(图中的■代表基因前的启动子),据图回答: (1)将图中质粒一导入到双子叶植物细胞中最常用的方法是 农杆菌转化法 .该方法中质粒一就是重组的 Ti 质粒.若不经过Cre酶处理,成功导入目的基因...