获得DNA序列了,就可以进一步利用Primer 3等软件进行qPCR引物的设计,用Blast检验引物特异性。 对于阴性对照的引物,可按照同样的方法,选择没有Peak富集的区域进行设计。 引物设计Tips 1. TF结合的区域通常是启动子,UTR这些A/T比例比较高的区域,因而如果设计出来的引物Tm值略低,也是正常的,只要可以保证引物的特异性,不...
Chip qPCR 引物定制(定位设计) 分类:PCR引物定制 品牌:BioTNT 货号:cust-Chipp 原价:询价 现价:¥ 节省:¥Label 特异性种属:human(人) / mouse(小鼠) / rat(大鼠) 类型:Chip qPCR 引物定制(定位设计) 规格:200ul*10um*2 产地:BioTNT产品参数 Chip qpCR定位设计: 1).查找该基因的启动子区域; 2)....
获得DNA序列了,就可以进一步利用Primer 3等软件进行qPCR引物的设计,用Blast检验引物特异性。 对于阴性对照的引物,可按照同样的方法,选择没有Peak富集的区域进行设计。 引物设计Tips 1. TF结合的区域通常是启动子,UTR这些A/T比例比较高的区域,因而如果设计出来的引物Tm值略低,也是正常的,只要可以保证引物的特异性,不...
对话框输入关键词:220505 那好,接着用这一段序列去设计引物。我们先如下打开NCBI的引物设计页面: 在这个页面设计引物的时候,我们只要修改产物长度就行,我们只要100-150bp左右的产物就行,对于做ChIP-qpcr来说的话。因为如果你设计太长了,在你做ChIP的时...
步骤一:使用参考文献提供的序列。若已有相关文献,可以直接引用文献中的 ChIP-qPCR 引物序列,这通常已通过验证。步骤二:查阅 ChIP-Seq 数据。Shirley Liu Lab 推出的 Cistrome Data Browser 收集了大量 ChIP-Seq 数据,通过筛选高质量数据,可以为设计引物提供可靠的依据。选择目标物种、细胞或组织类型、...
body区也可以设计一对作为参照。当然,如果在promotor区发现TF的motif,引物根据motif设计更好。
4、对Input、IP进行建库和测序可进行ChIP-seq分析,设计引物进行qPCR则为ChIP-qPCR实验。 二、引物设计 2-△△CT法计算原理会假设目标基因在不同的富集产物中的PCR效率基本相似,且ChIP在富集时会对DNA进行打断,因此在引物设计时,产物的长度不宜太长,通常150bp附近最佳。 对于富集类实验,老师可以根据前期seq的结果预...
Qubit 荧光计可以准确定量低水平的纯化 DNA,并可用于在 qPCR 之前对样品进行标准化或测序。 建议 •确定基因组中预计会富集和缺失 ChIP 靶标的区域 •为这些区域设计引物,确保扩增效率为 90% 至 105% •如果不知道目标蛋白结合的特定区域或其是否在任何地方结合,可以进行 ChIP-western ...
🎯 在CHIP-qPCR实验后,精准的引物设计分析至关重要。下面为你提供详细步骤:1️⃣ 引物设计基石 📚 若实验前有参考文献提供的引物序列,应优先考虑这些经过验证的引物。 🔍 若缺乏文献资料,可利用已发表的ChIP-Seq数据来指导引物设计。挑选通过质控的ChIP-Seq数据,并在UCSC等平台上查找峰值区域。
在这个引物设计页面,你只要改三个地方,如下: 也就是对DNA进行比对,找到这一段序列最合适的引物。接着等待即可: 引物就出来了: 我们可以看到该引物可以扩增出一个87bp的DNA和一个3779bp的DNA,后面这个不影响。因为 我们做ChIP的时候DNA片段都是很小的。长片段已经基本...