01实验分组(每组建议3-6个复孔)实验组:药物或者基因过表达等处理细胞+CCK-8试剂(见下表黄色列)对照组:不加药物等的对照细胞+CCK-8试剂(见下表绿色列)空白组:不加细胞的空白培养基+CCK-8试剂(见下表蓝色列)PBS孔:灰色,防止液体过度蒸发排版参考:02实验方案 1.种板细胞数:细胞增殖实验:每孔加...
CCK-8法测定细胞的增殖能力(1)制备细胞悬液:生长情况良好的细胞汇合率约80%的P3代HUVECs,胰酶消化方法制成细胞悬液。 (2)细胞接种:将常规培养的HUVECs细胞以2.0×103/孔,接种于96孔板中。 (3)测定A值并统计:每24小时,每组细胞任取8个孔,每孔中均加入标准制式的CCK-8液10μL。继续放入培养箱放置2小时,...
细胞增殖越多越快,颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅,对于同样的细胞,颜色的深浅与活细胞的数量成正比,因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。 机理图 图1. CCK-8检测原理图 CCK-8的优点 产生的甲瓒产物是水溶性的,无需换液,适合悬浮细胞 不需要放射性同位素和有机溶剂,对细胞的毒性小 CCK-8细胞活...
CCK-8法目前是生命科学研究中检测细胞增殖和毒性应用最广泛的方法之一,截至2022年,在Pubmed数据库中利用CCK-8试剂发表的文献数逐年递增。 实验原理 细胞增殖的检测方法众多,CCK-8是细胞增殖检测中的代谢活性检测,属于MTT的升级产品,操作较MTT更便捷(不需要DMSO溶解)。 工作原理:CCK-8可以被细胞线粒体内的脱氢酶还...
细胞活性的检测相当于细胞增殖能力的测定,采用特殊的试剂测定细胞的代谢活力或细胞代谢产物,通过检测细胞的氧化还原活性反映细胞增殖能力,属于间接检测细胞增殖能力的方法。 常用的细胞活性检测有:MTT法、XTT法、WST-1法、CCK-8法。 由此我们可以知道,CCK-8法是和MTT、XTT、WST-1法类似的方法,利用线粒体内部酶的活...
使用酶标仪在450nm波长处测OD值,可间接性反应活细胞的数量。是一种高灵敏度,无放射性的比色检测法。 因此,CCK-8实验可用于细胞因子等诱导的细胞增殖检测,也可以用于抗癌药物等对细胞有毒试剂诱导的细胞毒性检测,或一些药物诱导的细胞生长抑制检测。 操作步骤 ...
使用酶标仪在450nm波长处测OD值,可间接性反应活细胞的数量。是一种高灵敏度,无放射性的比色检测法。 (CCK-8实验原理) 因此,CCK-8实验可用于细胞因子等诱导的细胞增殖检测,也可以用于抗癌药物等对细胞有毒试剂诱导的细胞毒性检测,或一些药物...
实验一:细胞增殖检测1.制备细胞悬液:选取对数生长期细胞,吸弃旧液,用PBS洗涤细胞后加入胰酶,待细胞全部变圆后加入等量完全培养液终止消化,800-1000rpn室温,离心5min后吸弃上清,加入完全培养液重悬细胞、计数。2.接种96孔板:根据合适的铺板细胞数(根据自身的细胞类型而定,以一...
酚红和血清对CCK8法的检测不会造成干扰,可以通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去。 CCK8可以检测大肠杆菌,但不能检测酵母细胞。在细胞增殖实验每次测定的过程中需要避免细菌污染,以免影响结果。 CCK-8在0-5℃下能够保存至少6个月,在-20℃下避光可以保存1年。
超敏型细胞增殖检测试剂CCK-8是一种快速、灵敏的细胞增殖评估工具。其基于WST-8染料的原理使其能够准确地评估细胞的增殖能力。通过使用CCK-8测试剂,研究人员可以方便地评估细胞的增殖状态,为细胞生物学、药物筛选和细胞治疗研究提供有力支持。 该试剂仅用于科学研究领域,不适用于临床诊断或其他用途。