1.种板细胞数：细胞增殖实验：每孔加入约1000-2000个细胞，100μl培养基，每0，24，48，72h检测细胞的OD值。细胞毒性实验：每孔加入约5000～10000个细胞，100μl培养基（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。孔板周围加100μL PBS防止过度蒸发。2.检测方法在对应的检测时间...
CCK-8: (Cell Counting Kit-8),是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的检测试剂。 基本原理:CCK-8试剂中含有WST-8,它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯的作用下被细胞线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲臜产物,生成的甲臜物的数量与活细胞的数量成正比。细胞增殖越多越快,颜色...
CCK-8: (Cell Counting Kit-8),是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的检测试剂。 基本原理:CCK-8试剂中含有WST-8,它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯的作用下被细胞线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲臜产物,生成的甲臜物的数量与活细胞的数量成正比。细胞增殖越多越快,颜色...
②CCK-8 检测细胞增殖实验的分组考量在CCK8实验中，合理的分组设计至关重要。通常，需要设立实验组以观察不同处理条件下的细胞增殖情况，同时设置阴性对照组以对比未经处理的细胞，空白对照组则用于评估非特异性反应，而调零组则用于校正仪器背景噪音。②CCK-8 检测细胞增殖实验的分组考量在开展CCK-8实验时，合理的分...
▶Colony Forming:评估肿瘤干细胞的克隆生成能力和增殖能力。 ▶Ki-67免疫染色:检测肿瘤组织中Ki-67的表达水平,评估肿瘤细胞的增殖活性。 02.药物筛选和毒性研究 ▶CCK-8测定:进行高通量筛选,评估化合物对细胞增殖的影响。 ▶流式细胞术:测定细胞周期分布,判断药物对细胞周期的影响。
细胞毒性实验:每孔加入约5000～10000个细胞,100μl培养基(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。孔板周围加100μL PBS防止过度蒸发。 2.检测方法 在对应的检测时间点,从培养箱取出细胞,每孔加入10μL的CCK-8试剂,避光反映1-4h(具体孵育时间根据细胞数决定,一般OD值在0.8-1.5...
CCK-8是一种高灵敏度、无放射性的比色检测法,用于测定细胞增殖或毒性实验中活细胞数量,可替代传统的MTT法,常应用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验等。尽管有人戏称CCK-8测细胞增殖实验只要有试剂盒就“有手就行”,但实际操作中仍有许多细节需要注意。本期细胞学堂将详细介绍CCK-8法的原理、...
细胞增殖抑制实验是细胞生物学研究中的常规操作，尤其在药物筛选和毒性评估领域中占有重要地位。CCK-8（Cell Counting Kit-8）是一种广泛使用的细胞增殖和细胞毒性检测方法，因其操作简便、灵敏度高而受到研究者的青睐。然而，在实际操作过程中，我们可能会遇到各种问题。本期，我们非常荣幸联系到了来自厦门大学的吴老师...
CCK8全称Cell Counting Kit-8试剂,该试剂中含有水溶性的四唑盐WST-8,它在电子载体1-Methoxy PMS的作用下被细胞线粒体内的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物,甲瓒产物生成的数量与活细胞的数量成正比,利用酶联免疫检测其在450nm波长处测定其吸光度值,可间接反应活细胞数量。因此可利用这一特性直接进行细胞...
7. 培养1-4小时:细胞种类不同，形成的Formazan的量也不一样。如果显色不够的话，可以继续培养，以确认最佳条件。特别是血液细胞形成的Formazan很少，需要较长的显色时间（5-6小时）。8. 测定450nm吸光度：建议采用双波长进行测定，检测波长450-490nm，参比波长600-650nm。本期内容：CCK-8试剂盒进行细胞增殖检...