2.检测方法在对应的检测时间点,从培养箱取出细胞,每孔加入10μL的CCK-8试剂,避光反映1-4h(具体孵育时间根据细胞数决定,一般OD值在0.8-1.5时线性最佳),在酶标仪上450nm下检测OD值,检测前需震荡混匀。注:换液和不换液均可。若检测完以后第二天还需要再一次检测,则全部吸出黄色反应液,再加入新鲜培...
CCK—8细胞活性检测试剂中为1瓶溶液,毋需预制,即开即用。 CCK8的缺点: 与MTT法相比,CCK8和XTT的价格比较贵。 CCK8试剂的颜色为淡红色,与含酚红的培养基颜色接近,不注意的话容易产生漏加或多加。 与以往的增殖/毒性测定试剂相比较: 检测方法 MTT法 XTT法 WST-1法 CCK8法 甲臢产物的水溶性 差(需加有机...
5、CCK-8法对细胞毒性小,可以多次测定选取最佳测定时间,与MTT 方法相比线性范围更宽,灵敏度更高; 6、CCK-8 对细胞的毒性非常低,其他的实验,例如中性红法或结晶紫法 ,也可在 CCK-8 法检测完后继续进行。 苏州阿尔法生物提供的酶标仪、移液枪、Co2培养箱、显微镜、细胞计数仪等实验室设备和酶标板、96孔板、离...
二、CCK8 检测细胞增殖/毒性的方法 实验一:细胞增殖分析 1、制备细胞悬液:细胞计数 2、接种到 96 孔板中:根据合适的铺板细胞数,每孔约 100ul 细胞悬液,同样的样本可做 3 个重复。 3、37℃培养箱中培养:细胞接种后贴壁大约需要培养 2-4 小时,如果不需要贴壁,这步可 以省去。 4、加入 10ul CCK8:由于每...
3. 吸光度值检测。CCK-8加入后不同时间点(0.5h,1h,2h),利用酶标仪检测450 nm处吸光度值(OD值),选取最佳OD值做统计分析。4. 实验结果计算公式:细胞存活率=[(实验孔-空白孔)/(阴性对照孔-空白孔)]×100% 抑制率=[(阴性对照孔-实验孔)/(阴性对照孔-空白孔)]×100% 注意事项:1. 接种时细胞悬...
Cell Counting Kit-8(简称CCK-8)是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的检测试剂。WST-8【化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】,是一种类似于MTT的化合物,它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)存在的情况下,被...
悬浮细胞的CCK-8检测方法 CCK-8(Cell Counting Kit-8)是一种广泛应用于细胞增殖和细胞毒性检测的试剂,适用于悬浮细胞的检测。CCK-8试剂中含有的WST-8在电子载体的作用下被细胞中线粒体中的脱氢酶还原为水溶性的黄色甲瓒产物,其数量与活细胞的数量成正比。在进行悬浮细胞的CCK-8检测时,可以遵循以下步骤:准备...
CCK8检测细胞增殖的方法如下: 1.培养细胞至需要的生长阶段。 2.将培养基和CCK8溶液按照一定比例混合,制备CCK8试剂。 3.将细胞培养基抽取,加入CCK8试剂,温和地震荡混合。 4.在恒温培养箱中孵育一定时间(通常为1-4小时)。 5.使用多功能酶标仪或分光光度计测量样品的吸光度值。
CCK-8法是细胞活力和细胞毒性检测的常用方法。具体操作步骤包括:首先制备细胞悬液,选取生长良好的细胞,并计数;然后在96孔板中接种细胞悬液,并将培养板置于37℃、5% CO2的培养箱中预培养12至24小时;接着吸出培养基,加入不同浓度的待测药物干预培养板,培养6、12、24或48小时;每孔加入10ul CCK...
细胞增殖检测步骤包括:1. 细胞计数:对消化后的细胞悬液计数,取平均值。2. 细胞铺板:根据预接种细胞数量与计数结果调整浓度,均匀铺满96孔板,每孔100μL,置入37℃培养箱培养。铺板时注意混匀,避免细胞沉淀,可使用多通道移液器减少差异。加入CCK-8试剂时,斜贴板壁,避免产生气泡。3. 细胞处理...