应用场景一：细胞活性检测 1. 收集对数期细胞，调整细胞悬液浓度，96孔板每孔加入 100ul， 使待测细胞密度为1,000～10,000细胞/孔。2. 5% CO2，37℃ 培养细胞 24 小时（培养时间根据细胞种类的不同和每孔内细胞数量的多少进行调整）。3. 每孔加入10ul CCK-8 溶液。如果起始的培养体积200ul，则需加入 20...
使用curve_fit进行拟合后,可以通过找到50%细胞存活率时的浓度得到IC50。 总结 通过CCK-8实验,可以有效评估药物的细胞毒性和。实验步骤包括细胞培养、药物处理、加入CCK-8试剂和吸光度检测。数据分析则通过计算细胞存活率并绘制药物浓度-效应曲线,最后通过拟合曲线计算IC50。
在细胞活性检测中,细胞存活率是一个重要的指标,可用来反映某种因子对细胞生长和增殖的影响程度,它的计算公式如下: 细胞存活率=(染色体后细胞数目/染色体前细胞数目)×100% 用CCK8检测细胞活性的步骤应该为: 1)首先,在特定条件下,将细胞培养在涂覆有CCK8染料的细胞培养皿中,使细胞受因子的作用; 2)随后,在特定时...
细胞计数:首先,用细胞计数板计数你制备的细胞悬液中的细胞数量,然后接种细胞。 稀释细胞:按比例用培养基将细胞稀释成一个细胞浓度梯度,一般要做4-7个梯度,每组3-6个复孔。 培养细胞:接种后培养2-4小时,让细胞贴壁,然后加入CCK-8试剂(每100μL培养基加10μLCCK-8),再培养一段时间后测定OD值,制作出以细胞数...
细胞活性检测 🧬 接下来是细胞活性检测的部分: 在96孔板中接种细胞悬液(100 µL/孔),然后放在培养箱里预培养(37℃,5% CO2)。 每孔加入10 µL CCK-8溶液(注意不要在孔中生成气泡哦,它们会影响OD值的读数)。 把培养板放回培养箱孵育2小时。
CCK-8检测细胞活性。CCK-8法测定细胞活性 (1)以PBS配置浓度为5 mg·mL-1的药物溶液为母液,依次稀释成200 μg/mL、100 μg/mL、50 μg/mL、25 μg/mL、12.5 μg/mL 5个梯度浓度。 (2)收集对数期细胞,调整细胞悬液浓度,每孔加入100 μL ,铺板使待测细胞调密度至1000~10000/孔,(边缘孔用无菌PBS填...
CCK-8法目前是生命科学研究中检测细胞增殖和毒性应用最广泛的方法之一,截至2022年,在Pubmed数据库中利用CCK-8试剂发表的文献数逐年递增。 实验原理 细胞增殖的检测方法众多,CCK-8是细胞增殖检测中的代谢活性检测,属于MTT的升级产品,操作较MTT更便捷(不需要DMSO溶解)。
CCK8试剂盒中的化合物可以被代谢活跃的细胞还原,产生一种可以被光度计检测的有色产物。双波长检测是指在450纳米和630纳米两个波长下进行检测,分别用于测量还原产物的光密度。这种方法可以用来评估细胞的代谢活性和细胞增殖情况。 在进行CCK8双波长检测计算时,首先需要进行实验操作,将CCK8试剂与细胞培养物一起孵育一段...
二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲 ,用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值,可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内,MTT结晶形成的量与细胞数成正比。该方法已广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。它的特点是灵敏度高、经济。 缺点:由于 ...