应用场景一:细胞活性检测 1. 收集对数期细胞,调整细胞悬液浓度,96孔板每孔加入 100ul, 使待测细胞密度为1,000~10,000细胞/孔。2. 5% CO2,37℃ 培养细胞 24 小时(培养时间根据细胞种类的不同和每孔内细胞数量的多少进行调整)。3. 每孔加入10ul CCK-8 溶液。如果起始的培养体积200ul,则需
CCK-8试剂的使用:加入CCK-8试剂后,应迅速进行孵育和吸光度测定,以防止反应时间过长带来的背景干扰。同时,要注意避光,因为WST-8反应对光线敏感。控制组设置:实验中必须设立空白对照组(不含细胞和药物),以校正背景信号,从而准确测量细胞存活率。此外,还应设置阳性对照组(如已知具有细胞毒性的药物),以确保...
2.检测方法在对应的检测时间点,从培养箱取出细胞,每孔加入10μL的CCK-8试剂,避光反映1-4h(具体孵育时间根据细胞数决定,一般OD值在0.8-1.5时线性最佳),在酶标仪上450nm下检测OD值,检测前需震荡混匀。注:换液和不换液均可。若检测完以后第二天还需要再一次检测,则全部吸出黄色反应液,再加入新鲜培...
CCK-8试剂盒的原理和在细胞活性检测中的应用 CCK-8 比色检测试剂盒 Cell Counting Kit-8,是一种基于 WST-8 而广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速、高灵敏度、无放射性的比色检测试剂盒。WST-8 在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的一些脱氢酶的电子传递还原生成橙黄色的甲瓒 (Formazan)。而线粒体...
二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲 ,用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值,可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内,MTT结晶形成的量与细胞数成正比。该方法已广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。它的特点是灵敏度高、经济。 缺点:由于 ...
NEST细胞凋亡检测试剂盒采用细胞早期凋亡最常见的检测方法——Annexin V-FITC/PI双染法 (膜联蛋白免疫检测法)。细胞发生凋亡时位于细胞膜内的磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine, PS)会翻转到细胞膜表面,暴露于细胞外环境中。Annexin V是一种分子量为35.8KD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,能够与凋亡的细胞膜表面的PS发生...
01 基础实验:CCK8 测定 02 详细教程 ▐ 1. 制作标准曲线 ▐ 2. 细胞活性检测 ▐ 3. 细胞增殖-毒性检测 ▐ 4. 计算公式 ▐ MCE 验证 03 实操案例 ▐ 实验组别 ▐ 实验细胞 操作步骤 实验结论 04 小结 产品推荐: 参考文献: 01 基础实验:CCK8 测定 基础实验最伤人?NO,NO,NO,找对方法,稳住...
细胞活性、细胞增殖毒性检测 1、收集细胞,加细胞悬液100 μL (约5000-10000 个细胞)到96孔板(边缘孔用无菌水或PBS填充)。 每板设三个组,每组设定3-5复孔 2、2000r甩板离心5min,倒置显微镜下观察。【或37℃培养24 h,第二天拿出来要看细胞状态是否均处于良好状态】 ...
🔬 CCK-8法是一种广泛应用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验、活细胞计数、细胞活力检测以及生物因子活性检测的实验方法。📊 实验步骤: 1️⃣ 制作标准曲线: 首先,使用细胞计数板准确计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,然后进行接种。