(2)CAT酶活性测定:①取10ml 具塞试管,加2ml酶提取液于沸水浴中加热煮死,冷却备用。②取10ml 试管4支,3支为测定(3个重复),1支为对照,按下表加入试剂:③将上述4支试管于25℃水浴中预热3min后,逐管加入0.2ml 200 mmol·L -1 H2O2 溶液,每加一管立即在紫外分光光度计上测定 A240(蒸馏水调零)...
1. 试剂准备:将30% H2O2、0.004% NaN3、0.0166% KI、0.0333% NH4MoO4、50mM PBS缓冲液用去离子水配制成所需浓度。2. 样品处理:将待测生物样品进行破碎、匀浆处理,以提取出其中CAT。3. 实验操作:取不同浓度的CAT样品各1mL,分别加入1mL H2O2,混匀后立即计时。记录每10秒内CAT催化H2O2分解所生成的...
总结: CAT活性的测定方法主要有碘化钾法和比色法,两种方法均是通过间接测定过氧化氢酶催化反应产物氧气的生成量来计算CAT活性。碘化钾法利用滴定I2溶液的消耗量计算CAT活性,而比色法则通过测定酶催化反应产物的吸光度或荧光强度来计算CAT活性。选择合适的CAT活性测定方法应根据实验需求和设备条件来决定。©...
通过紫外吸收法测定CAT活性,我们可以得到CAT活性随时间的变化曲线。通过分析曲线的斜率,我们可以得到CAT的初速度。另外,我们还可以通过比较不同样品之间的CAT活性来了解不同样品抗氧化能力的差异。紫外吸收法是一种简单、快速、准确的测定CAT活性的方法。然而,该方法也存在一些局限性,例如可能受到其他物质如过氧化物...
CAT是一种能够催化过氧化氢(H2O2)分解为水和氧气的酶。常用的CAT活性测定方法包括: 紫外分光光度法:利用过氧化氢在紫外光下具有吸收的特性,通过测定反应液的吸光度变化来计算CAT活性。 酶偶联法:利用过氧化氢在过氧化物酶存在下被氧化水的特性,通过测定水的量来计算CAT活性。 抗氧化酶(SOD、POD、CAT)活性测定的...
CAT(过氧化氢酶)的活性通常通过测量其催化 H2O2 分解速率来确定。紫外吸收法可以用来测定 H2O2 含量的变化,但不能直接测定 CAT 活性。CAT 活性的计算公式是:CAT活性 = (ΔA/Δt) / ε其中,ΔA 表示 H2O2 吸光度的变化量,Δt 表示吸光度变化的时间,ε 表示 H2O2 的摩尔吸光系数。当使用紫莱贸生物...
1、抗氧化酶(sod、pod、cat)活性测定方法一、 超氧化物歧化酶(sod)活性测定(氮蓝四唑光化还原法)1、试剂的配制(1)0.05mol/l磷酸缓冲液(pbs,ph7.8):a母液:0.2mol/l磷酸氢二钠溶液: 取na2hpo412h2o(分子量358.14)71.7g;b母液:0.2mol/l磷酸二氢钠溶液:取nah2po42h2o(分子量156.01)31.2g。分别用蒸馏水...
3.2.2方法步骤 (1)酶液的提取:称取剪碎混匀的植物样品(如叶片等)1.0 g置于研钵中,加0.2 g CaCO3粉 末和2 mL蒸馏水研磨匀浆,移入量瓶中定容至100 mL,摇匀,静置,取上清液10 mL移入100 mL 量瓶中,蒸馏水定容至刻度,摇匀备用。 (2)...
学习果蔬组织中过氧化氢酶活性的测定原理和方法。二、基本原理 过氧化氢酶(Catalase, CAT)属于血红蛋白酶,含有铁,它能催化植物体内积累的过氧化氢(H2O2)分解为水和分子氧,从而减少H2O2对果蔬组织可能造成的氧化伤害。在CAT催化H2O2分解为水和分子氧的过程中,该酶起电子传递作用,而过氧化氢既是氧化剂又是...
04级 采用愈创木酚法测定POD酶活性。取光径1cm的比色杯2只,一只中加入反应混合液3mL,62.5mmol/l磷酸缓冲液1ml作为较零对照,另一只中加入反应混合液3mL,62.5mmol/l磷酸缓冲液0.9ml,上述提取得酶液0.1ml,立即开启秒表计时,于分光光度计470nm波长下测定OD值,每隔一分钟读数一次,以每分钟OD变化值表示...