（3）结果计算：以1 min内A240降低0.1（3支测定管的平均值）为一个酶活性单位（U），先求出3支测定管各自1min内A240降低值，按下式计算CAT活性。式中，△A240=As0-(As1+As2+As3)/3;As0:煮死酶液对照管吸光度；As1、As2、As3：样品测定管吸光度；Vt：酶提取液总体积(ml)；Vs：测定时取酶液的体积...
实验步骤 1. 试剂准备：将30% H2O2、0.004% NaN3、0.0166% KI、0.0333% NH4MoO4、50mM PBS缓冲液用去离子水配制成所需浓度。2. 样品处理：将待测生物样品进行破碎、匀浆处理，以提取出其中CAT。3. 实验操作：取不同浓度的CAT样品各1mL，分别加入1mL H2O2，混匀后立即计时。记录每10秒内CAT催化H2O2分解...
总结: CAT活性的测定方法主要有碘化钾法和比色法,两种方法均是通过间接测定过氧化氢酶催化反应产物氧气的生成量来计算CAT活性。碘化钾法利用滴定I2溶液的消耗量计算CAT活性,而比色法则通过测定酶催化反应产物的吸光度或荧光强度来计算CAT活性。选择合适的CAT活性测定方法应根据实验需求和设备条件来决定。©...
学习果蔬组织中过氧化氢酶活性的测定原理和方法。二、基本原理 过氧化氢酶（Catalase, CAT）属于血红蛋白酶，含有铁，它能催化植物体内积累的过氧化氢（H2O2）分解为水和分子氧，从而减少H2O2对果蔬组织可能造成的氧化伤害。在CAT催化H2O2分解为水和分子氧的过程中，该酶起电子传递作用，而过氧化氢既是氧化剂又是...
CAT活性可以通过分解过氧化氢生成水和氧气的过程来测定。在CAT的作用下，过氧化氢分解的速率与CAT的活性成正比。而过氧化氢在240nm波长处有强烈吸收，因此可以通过监测240nm波长处吸光度的变化来测定CAT活性。在一定的反应条件下，CAT活性可以通过单位时间内吸光度的变化值与标准曲线中对应浓度的吸光度变化值之比来...
CAT过氧化氢酶活性测定方法1.2.2 CAT提取方法 方法①:按文献[3]i己述的方法。取花瓣1.00 g,加入少量石英砂、质量分数10% 的PVP(聚乙烯吡咯烷酮),及i00 mg的CaCO3、2.O0 mL水,冰浴研磨;用50 mol/L pH 7.0 的磷酸缓冲液定容至10 mL;过滤;取滤液1.O0 mL,稀释lO、i00、200、500、1 000、2 000...
CAT（过氧化氢酶）的活性通常通过测量其催化 H2O2 分解速率来确定。紫外吸收法可以用来测定 H2O2 含量的变化，但不能直接测定 CAT 活性。CAT 活性的计算公式是：CAT活性 = (ΔA/Δt) / ε其中，ΔA 表示 H2O2 吸光度的变化量，Δt 表示吸光度变化的时间，ε 表示 H2O2 的摩尔吸光系数。当使用紫莱贸生物...
三、过氧化氢酶活性测定 3.1 紫外吸收法 3.1.1原理 H2O2对240nm波长的紫外光具有强吸收作用,CAT能催化H2O2分解成H2O和O2,因此在反应体系中加入CAT时会使反应液的吸光度(A240)随反应时间降低,根据A240的变化速率可计算出CAT的活性。 3.1.2方...
CAT过氧化氢酶活性测定方法 1.2.2 CAT提取方法方法① :按文献[3]i己述的方法。取花瓣1.00 g,加入少量石英砂、质量分数10%的PVP(聚乙烯吡咯烷酮),及i00 mg的CaCO3、2.O0 mL水,冰浴研磨;用50 mol/L pH 7.0的磷酸缓冲液定容至10 mL;过滤;取滤液1.O0 mL,稀释lO、i00、200、500、1 000、2 000倍...
活性较低,故第一步反应后剩余的H2O2越多,则第二步实验后检测到的荧光强度越强,即过氧化氢酶的活性与荧光强度呈负相关;实验第一步是过氧化氢在过氧化氢酶的作用下分解产生水和氧气,实验第一步进行的时间过长会影响实验的准确性,因为第一步进行的时间过长,过氧化氢被分解完,第二步无荧光释放,无法检测酶活性...