(3)结果计算:以1 min内A240降低0.1(3支测定管的平均值)为一个酶活性单位(U),先求出3支测定管各自1min内A240降低值,按下式计算CAT活性。式中,△A240=As0-(As1+As2+As3)/3;As0:煮死酶液对照管吸光度;As1、As2、As3:样品测定管吸光度;Vt:酶提取液总体积(ml);Vs:测定时取酶液的体积...
总结: CAT活性的测定方法主要有碘化钾法和比色法,两种方法均是通过间接测定过氧化氢酶催化反应产物氧气的生成量来计算CAT活性。碘化钾法利用滴定I2溶液的消耗量计算CAT活性,而比色法则通过测定酶催化反应产物的吸光度或荧光强度来计算CAT活性。选择合适的CAT活性测定方法应根据实验需求和设备条件来决定。©...
通过钼酸铵比色法测定过氧化氢酶(CAT)活性,可以发现不同生物样品中CAT活性存在差异。在一定范围内,CAT活性与生物体内抗氧化能力呈正相关关系。此外,不同生物样品中CAT活性的分布也具有一定的规律性,例如在植物的叶绿体和线粒体中CAT活性较高,而在动物的肝、脾、肾等组织中分布较广。这些结果提示我们,CAT在...
酶 2H2O2→ 2H2O + O2 因此,可根据反应过程中过氧化氢的消耗量来测定该酶的活性。过氧化氢在波长240 nm处除具有吸收峰,利用紫外分光光度计可以检测过氧化氢含量的变化。三、材料、仪器及试剂 (一)材料 苹果、梨、番茄等。(二)仪器及用具 研钵、高速冷冻离心机、紫外分光光度计、计时器、移液器、离心...
CAT过氧化氢酶活性测定方法1.2.2 CAT提取方法 方法①:按文献[3]i己述的方法。取花瓣1.00 g,加入少量石英砂、质量分数10% 的PVP(聚乙烯吡咯烷酮),及i00 mg的CaCO3、2.O0 mL水,冰浴研磨;用50 mol/L pH 7.0 的磷酸缓冲液定容至10 mL;过滤;取滤液1.O0 mL,稀释lO、i00、200、500、1 000、2 000...
1. 酶液制备:取一定量的组织或细胞,加入适量的缓冲液,研磨并离心取上清液。2. 反应液制备:将过氧化氢与缓冲液混合制成反应液。3. 标准曲线制作:取一系列不同浓度的过氧化氢溶液,加入适量的缓冲液和适量的CAT酶液,在240nm波长处测定吸光度,制作标准曲线。4. 样品测定:取适量的酶液和反应液,混合后在...
CAT(过氧化氢酶)的活性通常通过测量其催化 H2O2 分解速率来确定。紫外吸收法可以用来测定 H2O2 含量的变化,但不能直接测定 CAT 活性。CAT 活性的计算公式是:CAT活性 = (ΔA/Δt) / ε其中,ΔA 表示 H2O2 吸光度的变化量,Δt 表示吸光度变化的时间,ε 表示 H2O2 的摩尔吸光系数。当使用紫莱贸生物...
三、过氧化氢酶活性测定 3.1 紫外吸收法 3.1.1原理 H2O2对240nm波长的紫外光具有强吸收作用,CAT能催化H2O2分解成H2O和O2,因此在反应体系中加入CAT时会使反应液的吸光度(A240)随反应时间降低,根据A240的变化速率可计算出CAT的活性。 3.1.2方...
活性较低,故第一步反应后剩余的H2O2越多,则第二步实验后检测到的荧光强度越强,即过氧化氢酶的活性与荧光强度呈负相关;实验第一步是过氧化氢在过氧化氢酶的作用下分解产生水和氧气,实验第一步进行的时间过长会影响实验的准确性,因为第一步进行的时间过长,过氧化氢被分解完,第二步无荧光释放,无法检测酶活性...
CAT过氧化氢酶活性测定方法 1.2.2 CAT提取方法方法① :按文献[3]i己述的方法。取花瓣1.00 g,加入少量石英砂、质量分数10%的PVP(聚乙烯吡咯烷酮),及i00 mg的CaCO3、2.O0 mL水,冰浴研磨;用50 mol/L pH 7.0的磷酸缓冲液定容至10 mL;过滤;取滤液1.O0 mL,稀释lO、i00、200、500、1 000、2 000倍...