本研究主要是将4种不同的表达PCV2功能蛋白基因定点敲入到PK15细胞的Rosa26位点,从而建立稳定的细胞系,为研究PCV2病毒在哺乳动物细胞中复制水平低的机制奠定基础。本研究主要研究方法和结果如下:1. CRISPR/Cas9载体的构建基于猪基因组Rosa26位点设计合成2条单链寡核苷酸,pRosa26-g1-F和pRosa26-g1-R,退火使单...
These data suggest that CRISPR/Cas9 system targeting PCV2 essential genes may serve as a novel therapeutic agent against PCV2 infection in the future.doi:10.1016/j.molimm.2021.01.024Jianli ShiShuxuan ZhengXiaoyan WuZhe PengJun LiMolecular Immunology...
Plasmid Name质粒名称:BioVector® Control click editor - pCMV-T7-deadPCV2-nCas9-EcKlenow (EMK492) plasmid #208943Gene/Insert插入基因名称:dPCV2-XTEN-nSpCas9-BPNLS-EcKlenow(-exo)-BPNLS (Synthetic)Cat#货号: BioVector-0208943Map图谱:Sequence序列:Contact BioVector@163.comPromoter启动子:Insert/Gene...
旨在获得MRC1基因修饰的PCV2靶细胞并在体外验证该细胞对PCV2的抑制作用,为后续基因编辑猪的生产提供理论基础.本研究:1)首先利用基因工程技术建立了慢病毒介导的高效同源重组载体和CRISPR/Cas9基因靶向系统;2)通过细胞和分子生物学技术筛选了定点整合表达MRC1的PK15细胞系;3)随后通过细胞试验和PCV2的攻毒试验对其抗PCV...