CAR/TCR基因拷贝数的检测,主要包括CAR-T或TCR-T细胞悬液收获阶段和接受CAR-T或TCR-T细胞治疗的患者定期取外周血随访监测阶段。 针对上述情况,翌圣生物自主研发了CAR/TCR基因拷贝数检测试剂盒,采用多重荧光探针qPCR法分别检测CAR-T或TCR-T细胞基因组中CAR或TCR基因的拷贝数以及人体细胞中单拷贝基因(Single Copy Gene...
CAR-T作为一种活的细胞药物,纵向监测CAR-T细胞在体内的药代动力学是临床工作的重要组成部分,为评估治疗反应和相关副作用提供有价值的信息。因此,为了确保患者的安全和药物的疗效,监测CAR基因的拷贝数以及转基因整合到患者T细胞中的位置对于CAR-T细胞制造商至关重要。 载体拷贝数(Vector copy number, VCN),一个CAR所...
而通过对整合到T细胞基因组中的载体拷贝数(VCN) 进行检测,可以评估这种风险的大小。美国FDA要求在给病人输注CAR-T细胞前必须检测用于输注的CAR-T细胞的转基因拷贝数 (VCN) ,且VCN必须小于5拷贝/细胞。 往期推送: 干货| CAR-T细胞的临床药理学系列之一...
CAR - T细胞的常见应用是治疗过表达细胞外标记物的B细胞恶性肿瘤。嵌合抗原受体(CAR)T细胞是一种新型细胞疗法,其中自患者体内收获自体T细胞并进行基因修饰以表达嵌合抗原受体。测量载体整合到T细胞基因组的效率对于评估这些癌症免疫疗法的效力和安全性是很重要的。 分享的此文章主要是利用ddPCR检测溶液中空载体的浓度和整...
本发明涉及检测CAR‑T细胞中逆转录病毒载体拷贝数的引物、探针及试剂盒,包括:逆转录病毒载体的WPRE元件区的通用引物WPRE‑L、WPRE‑R及探针WPRE‑P用于检测VCN:所述WPRE‑L的序列示于SEQIDNO:1;所述WPRE‑R的序列示于SEQIDNO:2;所述WPRE‑P的序列示于SEQIDNO:3;所述病毒载体的部分序列示于SEQID...
本发明属于生物制品检测,涉及检测car-t细胞中逆转录病毒载体拷贝数的引物、探针及试剂盒,具体涉及基于双重qpcr(quantitative polymerase chainreaction, qpcr)法检测car-t细胞中逆转录病毒载体拷贝数的引物、探针及试剂盒。 背景技术: 1、嵌合抗原受体t细胞(chimeric antigen receptor t-cell,car-t)免疫疗法是目前肿瘤免疫...
1.本发明涉及生物技术领域,尤其涉及一种用于检测单个car-t细胞的慢病毒载体拷贝数的方法及其应用。 背景技术: 2.car-t指嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,car)t细胞,是指将能识别某种肿瘤抗原的抗体单链可变区(single chain antibody fragment,scfv)与胞内信号区在体外偶联为一个嵌合蛋白,通过基因转导的方法转...
1.一种检测CAR-T细胞基因组中病毒载体拷贝数的方法,其特征在于,包括步骤: 针对CAR-T细胞中的目的基因设计正向引物、反向引物及第一探针,挑选内参基因的正向引物、反向引物及第二探针; 设计用于检测引物扩增效率的基因序列,将所述用于检测引物扩增效率的基因序列配置成不同梯度浓度的溶液,每份样品检测同时加入目的基因的...
CAR‑T细胞的目的基因(慢病毒基因)序列及内参基因序列且拷贝数之比为1的DNA序列用于测定引物扩增效率之比,同时设计了特异性的可用于检测绝大部分CAR‑T细胞目的基因的引物与探针,并选用了数字PCR该检测方式,配合使用能减少检测误差,精确地反应CAR‑T细胞基因组中病毒载体拷贝数,从而来确保CAR‑T细胞治疗肿瘤的...
1.一种检测CAR-T细胞目的基因拷贝数的方法,其特征在于,包括如下步骤:S1、使用含CAR基因的质粒作为标准品母液,提取未转导的T淋巴细胞DNA作为背景DNA模板进行梯度稀释,制成标准品;S2、提取待测样品的DNA;S3、根据针对CAR-T细胞的靶点基因设计第一引物对,或者根据慢病毒的wpre片段设计第二引物对;并设计探针;S4、使用所...