作者认为,外周血中CD3+细胞计数减少,即“T细胞数量低”,可以作为CAR-T细胞来源“T细胞质量差”的标志;更进一步说明白细胞分离产物中含有增殖潜能差的T细胞,则CAR整合和表达水平的效率很低。另外,CD3+细胞计数较低的患者通常有较长的化疗...
CAR-T细胞是经过基因修饰的T细胞,旨在靶向并摧毁癌细胞。在CAR-T的制造过程中,EVE™ HT FL等高通量荧光细胞计数仪起着至关重要的作用。它们评估细胞活力、计数CAR-T细胞、确保原材料的质量控制、优化培养条件、确定最佳收获时间、检测污染物,并为符合监管要求的数据记录提供便利,从而提高CAR-T生产的效率和质量。...
CAR-T细胞疗法使用经过CAR改造的T细胞来治疗癌症。CAR-T免疫疗法的前提是修改T细胞识别癌细胞,以便更有效地靶向和消灭它们。科学家从人体中获取T细胞,对其进行基因改造,然后将产生的CAR-T细胞注入患者体内以攻击他们的肿瘤。 二、使用细胞计数仪监控CAR-T细胞疗法的生产 自2018年首次获得FDA批准以来,CAR-T疗法已使血液恶...
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今天结束的就是CAR T细胞治疗研究中的重要实验方法,即CAR T细胞活化水平以及增殖能力的检测。 CAR T 细胞活化水平的检测 细胞激活指标 CD69、细胞脱颗粒指标 CD107a、细胞杀伤因子指标如干扰素-γ、颗粒酶 B 均可以指示 CAR T 细胞的活化水平,并且这些指标可通过细胞表面染色或细胞内染色后使用流式细胞术进行检测。
提供CAR-T疗法的过程是专业和复杂的,许多关键挑战需要与实验室紧密结合的导航接口,包括单采后T细胞的计数、冷冻保存、储存和物流,以及CAR-T实验室检测的许多指标,再回输病人。CAR-T输注后,一系列独特的毒性再次需要临床和实验室血液学之间的密切联系,以实现最佳的患者...
控制CAR-T细胞对患者负面影响的安全措施 如上所述,在针对实体瘤的 CAR-T 细胞临床试验中,大多数靶向抗原并不完全具有肿瘤特异性。可能是抗原在正常健康组织上有一定程度的表达,并且由于意外杀死了共表达靶抗原的非恶性旁观细胞,CAR 可以诱导在靶上/肿瘤外毒性-T 细胞 [11]。为了能够在患者发现毒性后立即关闭 CAR...
下图展示了CAR-T和CAR-NK细胞疗法从细胞获取到疾病靶向的整个过程。对于CAR-T细胞,需要进行MHC匹配以防止排斥。对于CAR-NK细胞,MHC匹配的需要较少,从而简化了制备过程。不过,两者都经过工程改造和扩增,并重新引入患者体内以对抗疾病。▼CAR-T细胞和CAR-NK细胞治疗过程的对比图 ▲图源“MDPI”,版权归原作者...
将T9和T1CAR-T细胞与指定的肿瘤细胞以1:1的比例共培养。四天后,使用CountBright™绝对计数珠对门控的GFP+ CD3+ CD4+(Th9)或CD8+(Tc9)CAR-T细胞进行计数。Th9和Tc9 CAR-T细胞在与抗CD3/CD28珠或NALM6细胞的培养中均显示出强大的增殖能力,至少比其对应的Th1和Tc1 CAR-T细胞高5倍(图2i)。
首先,要对原发病进行评估,确认到底是肿瘤还是CRS引起的血小板减少,所以这就要求对细胞因子、淋巴细胞亚群、CAR-T细胞计数进行监测,以评估骨髓造血情况及外周免疫状态。其次,检测出凝血指标,除了FIB、APTT、PT、DIC等传统出凝血指标外,还要对血栓弹力图进行检测,确认是否存在出凝血功能障碍。最后,要进行ITP特异性...