首款CAR-T疗法的发明者:Carl H. June及第二代CAR-T设计 3. 第三代CAR-T 第三代CAR-T细胞,使用了慢病毒作为转染载体,可携带更大的基因片段进入T细胞。因此,CAR的胞内段往往可以包含两个共刺激域(CD28+4-1BB)。一些临床前研究表明,与第...
CAR-T细胞构造另一重要环节是转染CAR至T细胞内。转染用质粒常带有标记基因如GFP、RFP等，通过EXFLOW流式检测荧光信号可量化细胞的转染效率[9]。图7：流式检测CAR经慢病毒转染至T细胞的转染效率（左：未转染T细胞；中：健康患者T细胞转染效率；B-ALL患者T细胞转染效率）[9]6、CAR-T细胞质量检测 当CAR-T细胞构建成功...
鉴于此,IPHASE作为体外研究生物试剂引领者,为缩短免疫细胞疗法客户转染的复杂性和提高基因稳定转染的成功性,开发了慢病毒包装试剂盒(Lentivirus Packaging Kit)及慢病毒浓缩液(Lentivirus Concentration Reagent),为客户提供一站式解决方案! 三、IPHASE慢病毒产品 IPHASE慢病毒包装试剂盒(IPHASE Lentivirus Packaging Kit)包含...
由此,Emily成为了第一个CAR-T疗法治愈的儿童白血病患儿,她的例子也让CAR-T疗法瞬间受到了极大的关注。衍生的CTL-019疗法获得FDA批准后成为全世界第一个上市的CAR-T产品。 首款CAR-T疗法的发明者:Carl H. June及第二代CAR-T设计 3. 第三代CAR-T 第三代CAR-T细胞,使用了慢病毒作为转染载体,可携带更大的基...
到目前为止,慢病毒载体的设计大约经历了以下几个阶段: ❶两质粒系统 以HIV-1为骨架,将其中的反式作用蛋白基因序列去除,然后包装成为含有目标基因的重组质粒和能够反式提供病毒颗粒所需蛋白的包装质粒,共转染包装细胞(如293T细胞)进行包装。但这个系统由于存在产生野生型HIV的危险,现在已经不再使用。
如图所示,CD19抗原阳性细胞的数量随转染病毒梯度的增加而逐渐升高,表明该慢病毒有良好的感染活性,并按上述公式计算病毒滴度为:1.4×108 Tu/ml。 CD19-293T稳转细胞株构建 我们将成功制备的上述CD19病毒转染293T细胞,经过多轮筛选获得阳性率几乎为100%的CD19-293T细胞,其阳性率检测结果如下图所示。
靶向CD19的嵌合抗原受体(CAR)T细胞对B细胞恶性肿瘤的持续缓解,具有提高常规疗法低缓解率的潜力。我们曾经报道过3例难治性CLL治疗的初步研究结果。现在我们报道使用CAR-T细胞治疗的14例复发性难治性CLL患者的初步试验中成熟的研究结果。用慢病毒载体导入CD19 CAR的自体T细胞(CTL019),输注给复发/难治性CLL患者,输注...
慢病毒载体的结构 提起慢病毒包装，好多人只知道质粒共转染293T细胞，又或者对穿梭质粒、辅助质粒傻傻分不清楚，那么现在就从慢病毒的基因组入手，讲解一下病毒包装的原理：首先它的基因组可以分为三个编码病毒基本结构的【结构基因】：gag、pol、env；六个【调节基因】：tat、rev、nef、vif、vpr、vpu。但后来大家...
到目前为止,慢病毒载体的设计大约经历了以下几个阶段: ❶两质粒系统 以HIV-1为骨架,将其中的反式作用蛋白基因序列去除,然后包装成为含有目标基因的重组质粒和能够反式提供病毒颗粒所需蛋白的包装质粒,共转染包装细胞(如293T细胞)进行包装。但这个系统由于存在产生野生型HIV的危险,现在已经不再使用。
伊基奥仑赛(Eque-cel)是一种靶向BCMA的CAR-T疗法,于2023年6月在中国获批用于治疗至少接受过三线治疗的复发/难治性多发性骨髓瘤患者。该药物以慢病毒为基因载体转染自体T细胞,CAR包含全人源scFv、CD8a 铰链和跨膜、4-1BB共刺激和CD3ζ激活结构域;基于严...