CAR-T的生产制备流程主要包括最初分离和富集T细胞、T细胞活化、T细胞扩增、使用病毒或非病毒载体系统进行CAR基因转移、然后进行体外CAR-T细胞扩增,以及制成的细胞产品经过最后的末端工艺和冷冻保存。其中,将特定的CAR基因转导进T细胞的病毒载体是...
优选地,如上所述的一种car-t制备的慢病毒载体的使用方法,该载体可用于重组慢病毒,具体方法为:步骤1:将目的基因克隆入plvcd3-mcs载体获得重组慢病毒骨架载体;步骤2:将步骤1获得的重组慢病毒的骨架载体和pspax2和pmd2.0g共同转染宿主细胞,所述宿主细胞为hek293或hek293t细胞;步骤3:培养共同转染后的hek293t细胞;...
1、通过慢病毒载体将car基因转入人t细胞制备car-t细胞;2、通过逆转录病毒载体将car基因转入人t细胞制备car-t细胞;3、通过电转染方式将car基因转入人t细胞。由于慢病毒的感染效率很高,是一种十分有效的car-t制备手段。 技术实现要素: 针对上述技术问题,本发明提供一种含有car基因的慢病毒载体及其制备方法。构建获得的pel...
一种上述靶向cd152的复制缺陷性重组慢病毒的car-t转基因载体的构建方法,包括以下步骤:(1)将原核复制子、病毒复制子、抗性基因、慢病毒包装的包装顺式元件cis及病毒转录后的调控元件存储于慢病毒骨架质粒上;(2)将启动子、嵌合抗原受体car经过酶切、连接、重组反应克隆至步骤(1)中慢病毒骨架质粒中,得到含car的重组...
6.1.本发明提供了一种靶向tshr的scfv序列及car质粒序列; 7.2.本发明提供了一种靶向tshr的car慢病毒质粒的构建方法、质粒制备、慢病毒包装的流程; 8.3.本发明提供了一种靶向tshr的car ‑ t细胞治疗分化型甲状腺癌的治疗方案。与现有技术相比,本发明的有益效果是: ...