CAR-NK细胞疗法是一种新型的免疫疗法，其优点包括：①安全性：CAR-NK细胞疗法使用的是经过基因修饰的NK细胞，可以更安全地攻击肿瘤细胞，减少副作用和毒性。②高效性：CAR-NK细胞疗法结合了基因工程技术、免疫细胞治疗和靶向治疗等手段，可以更高效地杀伤肿瘤细胞，提高治疗效果。③持久性：CAR-NK细胞疗法通过增强NK细...
导读：CAR-NK细胞可以通过CAR的病毒和非病毒递送来制造。病毒载体的使用成本高、监管要求高、存在一些安全问题。有几种非病毒方法，如RNA电穿孔和DNA转染，但这些方法由于转染NK细胞的效率低而存在局限性。随着mRNA技术的日益成熟，科学家开始尝试采用mRNA-LNP技术来制备CAR-NK细胞。2023年，Promab Biotechnologies研发团...
car-nk制备方法 制备CAR-NK(CAR T细胞与自然杀伤细胞融合体)的方法如下: 1.提取T细胞和自然杀伤细胞:从患者的外周血或骨髓中提取T细胞和自然杀伤细胞。 2.购买或合成CAR基因:购买或合成所需的CAR基因,CAR基因通常包括一个特定的抗原识别结构区和T细胞活化信号转导区。这些基因可以通过合成DNA技术来获得。 3.制备反...
目前,人外周单核细胞(PBMC)是最主要的NK细胞来源,通过NK细胞分选试剂盒可以轻松获得高纯度NK细胞,进而实现临床级别的NK细胞制备。外周来源NK细胞制备的CAR-NK细胞通常会以CD56dimCD16+NK细胞为主,其占比可达到90%以上,这一类NK细胞具有较强的毒性作用,但其增殖能力较弱。脐带血也是NK细胞的一个重要来源,同PB来源...
不同来源的NK细胞制备方式有所区别,但是大致制备过程相同: (1)CAR结构的设计、NK细胞制备; (2)NK细胞的扩增、CAR转导,以制备CAR-NK; (3)CAR表型鉴定和免疫分型的研究; (4)CAR-NK 的扩增和功能分析; (5)建立动物模型进行临床前的体内评价。 在CAR-NK细胞的制备过程中还应注意,⽆论是外周⾎还是脐带⾎...
CAR-T细胞：CAR-T细胞通常来源于患者的T细胞。T细胞是适应性免疫系统的一部分，具有高度的特异性和记忆功能。采集患者的T细胞后，通过基因工程改造使其表达特定的CAR，然后进行扩增和回输。《Blood》杂志上的一项研究指出，高质量的T细胞采集是后续制备成功的基础。CAR-NK细胞：CAR-NK细胞则来源于患者的NK细胞。NK细胞...
对筛选后的CAR-NK细胞进行进一步的扩增和培养,以获得足够数量的细胞用于治疗。 5. CAR-NK细胞的功能检测: 检测CAR-NK细胞对靶细胞的杀伤活性、细胞因子分泌等功能。 评估CAR-NK细胞的特异性和安全性。 6. CAR-NK细胞的制剂制备: 将扩增后的CAR-NK细胞进行制剂制备,如冷冻保存或制成细胞悬液。 确保制剂的质量...
对于异体CAR-NK细胞治疗,细胞的培养总是细胞制备工艺中比较重要及花费时间最长的步骤。 应用案例 本研究Cytiva采用Xuri W25采用无血清培养基培养CAR-NK细胞,经过共18天的培养获得4e10个总活细胞数。NK细胞纯度>98%,NK细胞被有效激活,CAR-NK比例为59%。
NK细胞不仅适合作为基因编辑的工程细胞疗法,也适合单独扩增回输。 安全性好: 目前的临床研究表明CAR-NK不会发生移植物抗宿主病,此外NK细胞不分泌IL-1,IL6等炎症因子,CRS发生风险低。NK细胞寿命短,发挥作用后即消失,避免了活化细胞在体内存在时间太长而杀伤正常组织 易制备 NK细胞在体外的分离和扩增相对简单。