CAR-NK细胞疗法是一种新型的免疫疗法，其优点包括：①安全性：CAR-NK细胞疗法使用的是经过基因修饰的NK细胞，可以更安全地攻击肿瘤细胞，减少副作用和毒性。②高效性：CAR-NK细胞疗法结合了基因工程技术、免疫细胞治疗和靶向治疗等手段，可以更高效地杀伤肿瘤细胞，提高治疗效果。③持久性：CAR-NK细胞疗法通过增强NK细...
导读：CAR-NK细胞可以通过CAR的病毒和非病毒递送来制造。病毒载体的使用成本高、监管要求高、存在一些安全问题。有几种非病毒方法，如RNA电穿孔和DNA转染，但这些方法由于转染NK细胞的效率低而存在局限性。随着mRNA技术的日益成熟，科学家开始尝试采用mRNA-LNP技术来制备CAR-NK细胞。2023年，Promab Biotechnologies研发团...
CAR-NK细胞：CAR-NK细胞的制备过程相对简单，因为NK细胞具有天然的杀伤能力，不需要像T细胞那样经历复杂的激活和分化过程。此外，NK细胞的扩增速度较快，可以在较短时间内获得足够的细胞数量。《Cancer Research》杂志上的一项研究指出，优化的扩增条件可以显著提高CAR-NK细胞的数量和质量。识别与杀伤机制 CAR-T细胞和CAR...
car-nk制备方法 制备CAR-NK(CAR T细胞与自然杀伤细胞融合体)的方法如下: 1.提取T细胞和自然杀伤细胞:从患者的外周血或骨髓中提取T细胞和自然杀伤细胞。 2.购买或合成CAR基因:购买或合成所需的CAR基因,CAR基因通常包括一个特定的抗原识别结构区和T细胞活化信号转导区。这些基因可以通过合成DNA技术来获得。 3.制备反...
6. CAR-NK细胞的制剂制备: 将扩增后的CAR-NK细胞进行制剂制备,如冷冻保存或制成细胞悬液。 确保制剂的质量和稳定性。 7.临床应用: 根据患者的具体情况,制定个性化的治疗方案。 将CAR-NK细胞输注到患者体内,进行免疫治疗。 注意事项: 在整个制备过程中,需要严格遵守无菌操作规范,以防止污染。 对细胞培养条件和转...
目前,人外周单核细胞(PBMC)是最主要的NK细胞来源,通过NK细胞分选试剂盒可以轻松获得高纯度NK细胞,进而实现临床级别的NK细胞制备。外周来源NK细胞制备的CAR-NK细胞通常会以CD56dimCD16+NK细胞为主,其占比可达到90%以上,这一类NK细胞具有较强的毒性作用,但其增殖能力较弱。脐带血也是NK细胞的一个重要来源,同PB来源...
不同来源的NK细胞制备方式有所区别,但是大致制备过程相同: (1)CAR结构的设计、NK细胞制备; (2)NK细胞的扩增、CAR转导,以制备CAR-NK; (3)CAR表型鉴定和免疫分型的研究; (4)CAR-NK 的扩增和功能分析; (5)建立动物模型进行临床前的体内评价。 在CAR-NK细胞的制备过程中还应注意,⽆论是外周⾎还是脐带⾎...
对于异体CAR-NK细胞治疗,细胞的培养总是细胞制备工艺中比较重要及花费时间最长的步骤。 应用案例 本研究Cytiva采用Xuri W25采用无血清培养基培养CAR-NK细胞,经过共18天的培养获得4e10个总活细胞数。NK细胞纯度>98%,NK细胞被有效激活,CAR-NK比例为59%。
构建CAR-NK是为通过基因编辑新建一条活化NK细胞的激活通路并增强其抗肿瘤效应，且兼具靶向性(如CD19, CD20)。基因的稳定转染是实现NK细胞稳定表达CAR的前提。NK细胞使用传统的电穿孔法和脂质体转染效率低下，因此多数使用逆转录病毒和慢病毒载体。CAR-NK制备工艺复杂，过程中的无菌操作、细胞纯度、制备成品安全性等...