携带RD114包膜的α逆转录病毒对原代NK细胞的转导效率优于γ逆转录病毒和慢病毒,虽然使用不同的逆转录病毒可以在NK细胞中实现长时间稳定的CAR表达,但逆转录病毒系统的安全性仍然是一个问题,特别是与更安全的慢病毒相比。 电穿孔 随着技术的进步,与质粒相比利用高纯度和mRNA进行电转可以提高NK的转染效率,但是缺点是CAR...
CAR结构是工程T细胞或NK细胞疗法的关键。针对靶向实体瘤的痛点,逐渐发展出了百花齐放的局面。 整体来说CAR-NK的CAR结构主干和CAR-T的是相似的,只是在跨膜和ICS结构域方面有更多变化,例如采用aNKR的胞外结构域替换scFv等(17个NK细胞抗肿瘤靶点),在靶向性抗原的选择上也有重合(4类表达“NK细胞受体”的T细胞)。 克...
D.CAR构建的优化(Optimizing CAR Constructs):展示了针对NK细胞信号传导优化的CAR构建,包括不同的胞外scFv结构域、跨膜区和胞内共刺激域的选择,以提高CAR-NK细胞的疗效。 E.不同的NK细胞来源(Different Sources of NK Cells):讨论了不同的NK细胞来源,包括NK-92细胞系、外周血、脐带血、造血干细胞和诱导多能干...
有趣的是,在使用NK细胞系的研究中,研究实体瘤是血液恶性肿瘤的2倍以上。 CAR结构的设计 NK细胞上表达的功能性CAR分子由三部分组成:胞外结构域、跨膜区以及胞内的信号结构域。胞外结构域由一个信号肽和识别抗原的单链抗体片段(scFv)组成,一段铰链区将这个结构连接到跨膜区,它也在细胞内连接到包含激活信号的胞...
01、CAR-NK细胞结构及优化进程 与CAR-T细胞疗法类似,CAR-NK细胞通常也由三部分组成:胞外抗原结合区(ScFv)、跨膜结构域以及胞内激活结构域。目前CAR-NK的CAR结构前后经历了6次迭代,并向更加多元化的方向发展。 ①、第一代:只有一个胞内信号组分(CD3ζ); ...
CAR一般有三部分组成:胞外结构域、跨膜区及胞内信号结构域。胞外结构域由信号肽和识别抗原的单链抗体片段(scFv)组成。胞内信号结构域,如CD28、4-1BB(CD137)和OX40,通常起到触发免疫细胞激活和杀伤的作用。目前已有四代CAR结构可用于CAR-NK研究。 CAR结构设计(源自Leisheng Zhang, et al.)...
NK细胞上表达的功能性CAR分子与CAR-T大致相同，由三部分组成：胞外结构域、跨膜区以及胞内的信号结构域。胞外结构域由一个信号肽和识别抗原的单链抗体片段（scFv）组成，一段铰链区将这个结构连接到跨膜区，它也在细胞内连接到包含激活信号的胞内结构域。信号肽：CAR序列以短信号肽(SP)开始。它们是位于蛋白质N...
3. CAR 结构 大多数CAR-NK细胞研究都使用CAR-T细胞设计的CAR,少部分是针对NK细胞专门设计的CAR。含有4-1BB共刺激域(scFv-CD8TM-4-1BB-CD3ζ)的第二代抗CD19CAR 可在原代NK细胞中表达。生产的NK细胞可特异性杀伤CD19+急性淋巴细胞白血病细胞。针对HER2、EGFR或EGFR变体Ⅲ和CS1的CAR-NK也已开发出。此外,具...
▲ CAR构建体结构图 图源:参考资料1 增殖 NK细胞占外周单核细胞的10%左右,在用于治疗时需要进行筛选和扩增,同时需要完全清除T细胞,以减少其带来的移植物抗宿主病。目前,人外周单核细胞(PBMC)是最主要的NK细胞来源,具有较强的细胞毒性,但增殖能力较弱。NK细胞的另一个主要来源是脐带血(UCB),通过这种方式产生的NK...