分别设计p-gp、bcrp及mrp基因单敲除及两两组合双敲除,分别将构建u6-sgrna质粒与hcas9质粒共转染caco-2细胞,72h后加800ug/mlg418筛选,每2天换药一次,7天后消化消化细胞,有限稀释法稀释细胞,以100个细胞每孔的密度铺5个10cm平皿,15天待单克隆细胞长至0.5cm,可进行挑取。挑取细胞单克隆至24孔板培养,长满后取1/...
目的 探讨苦瓜蛋白MD28对Caco-2细胞胆固醇转运相关基因表达的影响,阐明苦瓜蛋白MD28抗动脉粥样硬化的作用机制.方法Caco-2细胞经培养传代分为四组:(1)Caco-2细胞对照组;(2)Caco-2胆固醇转运细胞模型组;(3)Caco-2胆固醇转运细胞模型+苦瓜蛋白MD28处理组;(4)Caco-2细胞+苦瓜蛋白MD28处理组.加相应的处理因素处理后...