不允许细胞过度汇合(>90%),否则会影响随后Caco-2单层细胞的形成。将细胞培养液吸出,用PBS清洗2次,加入0.25%胰蛋白酶-0.02% EDTA进行消化。 3.取细胞适量接种到培养瓶继续培养或进行铺板操作。 转运实验 1. 接种细胞:用培养基将Caco-2细胞浓度调整至1.0-1.5×105/ml,...
Caco-2细胞体外培养条件下可自发进行上皮样分化,形成与小肠上皮细胞相同的微绒毛结构和紧密连接,形态学、标志酶的功能表达及渗透特征都与小肠柱状上皮细胞很相似。在Caco-2细胞中,主要药物转运体如寡肽转运体PEPTI,P-糖蛋白MDRI、多药耐药相关转运蛋白MRP2和有机阴离子转运多肽OATP2B1均有较高水平表达,能够快速得到...
1、Caco-2 细胞转运实验人结肠癌细胞系Caco-2是用来研究药物经肠吸收的常用模型。Caco-2细胞体外培养条件下可自发进行上皮样分化,形成与小肠上皮细胞相同的微绒毛结构和紧密连接,形态学、标志酶的功能表达及渗透特征都与小肠柱状上皮细胞很相似。在Caco-2细胞中,主要药物转运体如寡肽转运体PEPTI,P-糖蛋白MDRI、多...
以下是构建Caco-2单层细胞渗透转运模型的详细实验方案: 1. 实验准备 细胞准备: 细胞系:获取Caco-2细胞株。 培养基:使用适合的培养基,如Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) 添加10%胎牛血清(FBS)和1%抗生素 培养器具:无菌的培养瓶、细胞培养板(通常为Transwell® 24孔板)。
人结肠癌细胞系Caco-2是用来研究药物经肠吸收的常用模型。Caco-2细胞体外培养条件下可自发进行上皮样分化,形成与小肠上皮细胞相同的微绒毛结构和紧密连接,形态学、标志酶的功能表达及渗透特征都与小肠柱状上皮细胞很相似。在Caco-2细胞中,主要药物转运体如寡肽转运体PEPTI,P-糖蛋白MDRI、多药耐药相关转运蛋白MRP2和...
1、分化Caco-2细胞模型的特征和建立方法 经过21 天的体外培养,Caco-2细胞可以在微孔膜上分化成致密的极性单分子层。大量研究证明,极化Caco-2细胞可表达肠黏膜上皮细胞的一些结构和功能特征,如微绒毛、紧密连接、绒毛膜表面特异性水解酶以及胰岛素、肽、维生素D、果糖和葡萄糖的特异性转运体。此外,存在于肠上皮细胞...
Caco-2 细胞转运模型是被国外制药企业以及实验室应用的模拟肠道吸收的药物筛选模 型,已广泛应用于药物在小肠吸收的评价和转运机制研究中。Caco-2 细胞的结构和功能类似 于人小肠上皮细胞,含有与小肠刷状边缘上皮相关的酶系。 与正常的成熟小肠上皮细胞在体外培育过程中出现的逆向分化不同,Caco-2 细胞在多孔可渗 ...
1、分化Caco-2细胞模型的特征和建立方法 经过21天的体外培养,Caco-2细胞可以在微孔膜上分化成致密的极性单分子层。大量研究证明,极化Caco-2细胞可表达肠黏膜上皮细胞的一些结构和功能特征,如微绒毛、紧密连接、绒毛膜表面特异性水解酶...
目前,制药行业正利用Caco-2细胞开展渗透性分析,以估计候选药物穿过小肠上皮的能力。Caco-2细胞模型的具体应用包括:研究口服药物是从A到B方向还是从B到A方向转运,并明确药物吸收是被动扩散还是主动转运,为给药方案提供依据。 当然,我们首先要培养Caco-2细胞。细胞通常被接种到Transwell或Snapwell小室中,这些小室分为上下...