将细胞培养液吸出,用PBS清洗2次,加入0.25%胰蛋白酶-0.02% EDTA进行消化。 3.取细胞适量接种到培养瓶继续培养或进行铺板操作。 转运实验 1. 接种细胞:用培养基将Caco-2细胞浓度调整至1.0-1.5×105/ml,在Transwell板的基底侧(Basolateral side,B)加入1.5 ml MEM完全培养...
Caco-2细胞转运实验详细讲解 Caco-2 细胞转运实验 ⼈结肠癌细胞系Caco-2是⽤来研究药物经肠吸收的常⽤模型。Caco-2细胞体外培养条件下可⾃发进⾏上⽪样分化，形成与⼩肠上⽪细胞相同的微绒⽑结构和紧密连接，形态学、标志酶的功能表达及渗透特征都与⼩肠柱状上⽪细胞很相似。在Caco-2细胞中，...
Caco-2细胞模型是将Caco-2细胞接种于半透膜(多为聚碳酸酯多孔膜)上,待细胞生长分化为完整的细胞单层(一般21～24天),即可模拟人体肠道上皮吸收屏障,用于药物通透性实验(图11-5)。 近来研究发现,犬肾上皮细胞系MDCKⅡ和Caco-2细胞在许多药物的转运上具有很好的相关性,且其培养周期较短(3～5天)即可形成完整细胞单...
1. 实验准备 细胞准备: 细胞系:获取Caco-2细胞株。 培养基:使用适合的培养基,如Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) 添加10%胎牛血清(FBS)和1%抗生素 培养器具:无菌的培养瓶、细胞培养板(通常为Transwell® 24孔板)。 培养条件: 培养环境:37°C,5% CO₂。 2. 细胞接种与培养 细胞接种: 准备细胞悬...
1、Caco-2 细胞转运实验人结肠癌细胞系Caco-2是用来研究药物经肠吸收的常用模型。Caco-2细胞体外培养条件下可自发进行上皮样分化,形成与小肠上皮细胞相同的微绒毛结构和紧密连接,形态学、标志酶的功能表达及渗透特征都与小肠柱状上皮细胞很相似。在Caco-2细胞中,主要药物转运体如寡肽转运体PEPTI,P-糖蛋白MDRI、多...
Caco-2 细胞来源于人体结直肠腺癌细胞,是一种多克隆的连续细胞系,在体 外特定的培养条件下,Caco-2 发育分化并极化,从而形成与小肠上皮细胞相似的表 型、形态与功能(Pinto et al 1983,Hidalgo et al 1989)。…
Caco-2细胞模型是将Caco-2细胞接种于半透膜(多为聚碳酸酯多孔膜)上,待细胞生长分化为完整的细胞单层(一般21～24天),即可模拟人体肠道上皮吸收屏障,用于药物通透性实验(图11-5)。 近来研究发现,犬肾上皮细胞系MDCK Ⅱ和Caco-2细胞在许多药物的转运上具有很好的相关性,且其培养周期较短(3～5天)即可形成完整细胞...
Caco-2细胞在聚碳酸酯膜上培养21天后可自发分化为小肠微绒毛上皮细胞，并能稳定表达小肠中的一些主要吸收转运蛋白、外排转运蛋白和代谢酶。为了更好地模拟生理环境，禁食状态的人肠液（Fassif）用于供体侧，接收缓冲液中加入1%牛血清白蛋白（BSA）。BSA不仅提供药物膜转运的下沉条件，还能减少药物在聚碳酸...
Caco-2细胞的细胞紧密性和电阻值，是衡量其作为药物吸收与转运模型的重要指标。我们首先通过严谨的实验步骤，如Cellular Uptake and Transport Characteristics of FL118 Derivatives in Caco-2 Cell Monolayers研究，验证了模型的精确性和重现性。Caco-2细胞单层模型因其高度模拟了小肠微绒毛上皮细胞的特性，...
目前,制药行业正利用Caco-2细胞开展渗透性分析,以估计候选药物穿过小肠上皮的能力。Caco-2细胞模型的具体应用包括:研究口服药物是从A到B方向还是从B到A方向转运,并明确药物吸收是被动扩散还是主动转运,为给药方案提供依据。 当然,我们首先要培养Caco-2细胞。细胞通常被接种到Transwell或Snapwell小室中,这些小室分为上下...