所以孵一抗时加入1%BSA,BSA可以用于中和一抗中的非特异性抗体,起到降低假阳性的作用.孵二抗时加1%BSA 同理
Q3、封闭液一般是用5%的BSA或者是用5%的脱脂奶粉,溶剂一般使用TBST。做实验的时候,我一直强调这样的一个原理,那就是在了解原理的基础之上,我们完全可以不拘泥于书本,进行创造。就拿这个封闭液来讲,要是单纯的一种封闭效果仍然不好的话,我们完全可以两种合用,我就试过1%...
1. 由于BSA中含有微量牛IgG,其结构与羊(Goat and Sheep)IgG极其类似,因此来源于羊的一抗或二抗能与牛IgG交叉反应,产生高背景,因此该封闭液不推荐用于羊来源的一抗或抗羊的二抗。 2. 该封闭液适用于Streptavidin/Biotin系统以及AP底物检测系统。 3. 本封闭液不含叠氮化钠,可以用于HRP标记的一抗的封闭。
⚠️⚠️解决办法:1.奶粉/BSA提前配制,最好在摇床上45r慢摇30min最好,必要时可放入搅拌器上搅拌;2.封闭时间一直推荐室温4-6h,或者4度摇床封闭过夜效果最好,快封需要好好挑选一下;3.wb任何步骤,膜不宜长时间置于tbst以外,并且发光时最好铺一张手套膜,避免之前同学的发光液或者异物残留;4.tbst配制后,...
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