蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB )需要选择一种蛋白作为内参蛋白。内参就是内部参照,一般是指管家基因...
b-actinb-actin b-Actin是指PCR常用的内参,P-Actin抗体是WesternBlot很好的内参指数。内参即是内部参照(InternalControl),对于哺乳动物细胞表达来说一般是指山管家基因编码表达的蛋口。它们在各组织和细胞中的表达相对恒定,在检测蛋口的表达水平变化时常用它来做参照物。 b-actin的蛋白水平通常不会发生改变,因此被...
在蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)实验中,选择内参蛋白是关键一步。内参蛋白,作为内部参照,通常来源于管家基因编码的蛋白。这类蛋白在不同组织和细胞中的表达水平保持相对稳定,因此在研究蛋白质表达量变化时,内参蛋白用作参照物,有助于校正蛋白质定量及上样过程中的误差,确保实验结果准确性。内参...
还有人不知道Western blot实验内参基因 >Actin内参基因内参基因Actin选择和注意事项1).研究模型是心肌,骨骼肌或者平滑肌(这些组织有特异的actin)2).肌肉组织(由于肌肉组织中β-actin分布很少,不易检测)3).细胞或肿瘤恶化时,B-actin 的表达水平异常4).细胞总蛋白的Western Blot的内参蛋白一般用B-actin5).某些特殊组...
b-actin,全称为β-actin,是一种在生物体内具有广泛重要性和多功能性的细胞骨架蛋白。以下是对b-actin的详细解析:
Western 内参使用的GAPDH和B-actin蛋白的分子量分别为:1. GAPDH的分子量约为36kDa。2. B-actin的分子量约为42kDa。解释:GAPDH是一种在细胞代谢中起关键作用的酶,广泛存在于各种生物体中。其分子量约为36kDa,这在蛋白质分子量中属于中等大小。在Western Blot分析中,GAPDH常作为内参蛋白使用,用于...
广泛分布于细胞浆中,表达量非常丰富。B-actin作为一种管家基因编码表达的蛋白(Housekeeping Protein),在不同物种之间高度保守。因此,在大多数组织和细胞中常被用作内参,即内部参照(Intern Control)。普遍应用于Western Blot实验来校正蛋白质定量、上样过程中存在的误差,确保实验的准确性。
在Western Blot实验中,内参蛋白GAPDH和B-actin扮演着关键角色。GAPDH的分子量约为146千道尔顿(KD),在检测条带上通常显示出36kD的信号。而B-actin的分子量更低,为42KD。这些内参蛋白的存在对于实验的准确性和可比性至关重要,因为它们作为参照标准,确保在不同条件或组织中对比目的蛋白表达时,样本量...
western 内参用的GAPDH分子量为146KD,检测条带大约在36kD,B-actin分子量为42KD。严谨的Western Blot...
4. 做诱导后样本或检测磷酸化等修饰性抗体时,选择结构蛋白作为内参,如beta Actin和beta Tubulin。因为GAPDH是代谢类蛋白,表达量有可能会受到诱导处理的影响。同时,做修饰性抗体的Western Blot实验,最好也带上同抗原的总抗作为阳性对照。 5. 做Western Blot实验时,内参...