在Annexin V-FITC/PI双染法中，Annexin V是一种可以特异性结合暴露在细胞外的磷脂酰丝氨酸（PS）的蛋白。当细胞发生凋亡时，PS会从细胞内转移到细胞膜外侧，这使得Annexin V能够与之结合。通过使用FITC标记的Annexin V，可以在荧光显微镜下观察到早期凋亡细胞的绿色荧光信号。与此同时，碘化丙啶（PI）是一种能够穿...
Annexin V-FITC / PI 荧光双染细胞凋亡检测试剂盒用于鉴定凋亡和坏死细胞。Annexin V 是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸 PS 有高度亲和力，可通过细胞外侧暴露的 PS 与凋亡早期细胞胞膜结合，将 Annexin V 标记荧光染料 FITC，利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。碘化丙啶（Propidium Iodide,...
活细胞:Annexin V-FITC⁻/PI⁻ 早期凋亡细胞:Annexin V-FITC⁺/PI⁻ 晚期凋亡或坏死细胞:Annexin V-FITC⁺/PI⁺ 机械损伤细胞:Annexin V-FITC⁻/PI⁺ 二、实验操作的核心步骤 样本准备 收集待测细胞(如药物处理的肿瘤细胞),离心后弃上清。 用预冷的PBS洗涤两次,避...
Annexin V-FITC/PI双染法是一种常用的细胞凋亡检测技术,能够有效区分早期凋亡细胞和坏死细胞。这一方法利用了Annexin V与细胞膜磷脂的结合特性以及碘化丙啶(PI)对细胞膜完整性的指示作用,从而实现对细胞凋亡的精确检测。 在Annexin V-FITC/PI双染法中,Annexin V是一种可以特异性结合暴露在细胞外的磷脂酰丝氨酸(...
对于坏死细胞，由于细胞膜的完整性已经丧失，Annexin V-FITC可以进入到细胞浆内，与位于细胞膜内侧的磷脂酰丝氨酸结合，从而也使坏死细胞呈现绿色荧光。通过流式细胞仪、荧光显微镜或其它荧光检测设备能够对凋亡情况进行检测。本试剂盒也提供了碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)染色液。碘化丙啶是一种能结合DNA的菲啶类...
5、随即进行流式细胞仪检测，Annexin V-FITC为绿色荧光，PI为红色荧光。▶ 贴壁细胞收集染色 1、把细胞培养液吸出至一合适离心管内，PBS洗涤贴壁细胞一次，用胰酶细胞消化液(最好不用含有EDTA)消化细胞。2、细胞消化下来后，同理悬浮细胞的操作步骤。▶ 上机检测 染色孵育后，立即进行流式细胞仪检测或荧光显微镜...
Annexin-V为Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，对PS有极强的结合力。PI是一种经济、稳定的核酸染料，它不能透过正常细胞或早期凋亡细胞的完整的细胞膜，但可以透过凋亡晚期和坏死细胞的细胞膜而使细胞核染红。将Annexin V与PI联合使用时，PI被排除在活细胞和早期凋亡细胞之外，而晚期凋亡细胞和坏死细胞同时被FITC和PI结合染色...
Annexin-V为Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,对PS有极强的结合力。PI是一种经济、稳定的核酸染料,它不能透过正常细胞或早期凋亡细胞的完整的细胞膜,但可以透过凋亡晚期和坏死细胞的细胞膜而使细胞核染红。 将Annexin V与PI联合使用时,PI被排除在活细胞和早期凋亡细胞之外,而晚期凋亡细胞和坏死细胞同时被FITC和PI结合染色呈现...
未染色组：不加抗体 Annexin V单染组：将细胞置于55℃水浴中处理10分钟，或加入凋亡诱导剂诱导细胞凋亡，随后加入5μl Annexin V-FITC。PI单染组：取一半细胞加入4%多聚甲醛（使细胞死亡），离心后用PBS洗涤，再与正常活细胞混合，并加入5μl PI。Annexin V和PI双染组：同样进行55℃水浴处理或加入凋亡诱导剂...
A以Annexin V-FITC/PI双染为例，凋亡前期的细胞只带FITC荧光，凋亡后期及坏死细胞除FITC荧光外还会带PI荧光，从流式和荧光显微镜结果来看的话见下图示例：左图：SF9细胞（SNL-170）高密度培养24h后通过Annexin V-FITC染色检测，采用荧光显微镜观察（白光+FITC荧光+PI荧光三色合成图片），无荧光为正常细胞，FITC荧光...