Annexin V是一种分子量为35~36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，能与磷脂酰丝氨酸（PS）高亲和力特异性结合。在细胞凋亡早期，只分布在正常细胞膜脂质双层内侧的磷脂酰丝氨酸（PS）翻向外侧，用标记了荧光素的Annexin V作为荧光探针，并搭配PI、7-AAD、DAPI等核酸染料使用，能够准确区分正常细胞、凋亡早期和凋亡晚期细胞。
建议在实验开始阶段分析经Annexin V、PI分别单染的细胞来调整荧光补偿去除光谱重叠。根据未处理细胞空白对照和经Annexin V、PI分别细胞染色后的单染对照的分析设定十字门的位置;4 正常细胞:Annexin ⅴ-FITC (-);PI (-); 早期凋亡细胞:Annexin ⅴ-FITC (+);PI (-); 晚期凋亡细胞: Annexin ⅴ-FITC (+);PI...
图1. Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测原理 流式细胞仪分析: FITC最大激发波长为488 nm,最大发射波长525 nm,FITC的绿色荧光在FL1通道检测; PI-DNA复合物的最大激发波长为535 nm,最大发射波长为615 nm,PI的红色荧光在FL2或FL3通道检测。 图2. Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测结果 在凋亡实验中,经常会出现假...
摘要: 课程组面向本科生开设了利用Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡的实验项目。该实验加入化疗药物依托泊苷(简称VP-16)诱导Jurkat细胞发生凋亡,使用Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡情况,在荧光显微镜下拍照计数。实验结果表明:紫外光激发下,早期凋亡细胞呈现绿色荧光,而晚期凋亡细胞和坏死细胞呈现红色...
Annexin V-EGFP荧光信号呈绿色,PI荧光信号呈红色。 B. 流式细胞仪分析 用流式细胞仪检测,激发波长Ex=488 nm; 发射波长Em=530 nm。 Annexin V-EGFP的绿色荧光通过FITC通道(FL1)检测;PI红色荧光通过PI通道(FL2或FL3)检测,建议使用FL3。 荧光补偿调节:使用未经凋亡诱导处理的正常细胞,作为对照进行荧光补偿调节去...
Annexin V-FITC/PI双染流式分析细胞凋亡（图1）：图2：用阴性对照(左)或staurosporine(一种凋亡诱导剂)处理Jurkat细胞4小时，清洗，然后用ICT的Annexin V-FITC凋亡检测试剂盒(货号9124)染色10分钟。在流式细胞仪上读数细胞。阴性对照组仅在2.7%的细胞群中诱导了Annexin V-FITC标记(R2，左)，而staurosporine实验组...
Q1：(AnnexinV-FITC)-/PI+，此区域的细胞为坏死细胞。也可能有少数的晚期凋亡细胞在其中，甚至机械损伤的细胞也包含其中。Q2:(AnnexinV+FITC)+/PI+，此区域的细胞为晚期凋亡细胞。Q3：(AnnexinV-FITC)+/PI-，此区域的细胞为早期凋亡细胞。Q4：(AnnexinV-FITC)-/PI-，此区域的细胞为活细胞。资料...
AnnexinV流式细胞术细胞凋亡5-FU目的:探讨化疗药物5-氟尿嘧啶(5-FU)诱导肿瘤细胞凋亡的作用特性,同时分析AnnexinⅤ -FITC/PI双标记流式细胞术在检测细胞凋亡中的应用.方法:采用不同浓度的5-FU作用于培养的结直肠癌细胞株colo320,并设不同的时间段, 应用流式细胞术和Hoechst33342荧光染色两种方法观察5-FU诱导肿瘤...
FITC-Annexin V结合到细胞后,在蓝色光的激发下,发出绿色荧光。碘化丙啶(Propidium iodide,PI)是一种核酸染料,它不能穿透完整细胞膜,但对凋亡晚期细胞和死细胞的破损细胞膜能够穿透,并使细胞核红染,而细胞膜保持完好的早期凋亡细胞则不会有红色荧光产生。联合应用AnnexinV-FITC和PI对培养体系中的细胞进行染色,...