图1. Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测原理 流式细胞仪分析: FITC最大激发波长为488 nm,最大发射波长525 nm,FITC的绿色荧光在FL1通道检测; PI-DNA复合物的最大激发波长为535 nm,最大发射波长为615 nm,PI的红色荧光在FL2或FL3通道检测。 图2. Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测结果 在凋亡实验中,经常会出现假...
摘要: 课程组面向本科生开设了利用Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡的实验项目。该实验加入化疗药物依托泊苷(简称VP-16)诱导Jurkat细胞发生凋亡,使用Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡情况,在荧光显微镜下拍照计数。实验结果表明:紫外光激发下,早期凋亡细胞呈现绿色荧光,而晚期凋亡细胞和坏死细胞呈现红色...
Annexin V是一种分子量为35~36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,能与磷脂酰丝氨酸(PS)高亲和力特异性结合。在细胞凋亡早期,只分布在正常细胞膜脂质双层内侧的磷脂酰丝氨酸(PS)翻向外侧,用标记了荧光素的Annexin V作为荧光探针,并搭配PI、7-AAD、DAPI等核酸染料使用,能够准确区分正常细胞、凋亡早期和凋亡晚期细胞。
Annexin V和PI双染法研究细胞凋亡是经典的流式实验之一,磷脂酰丝氨酸(phosphotidylserine, PS)在正常细胞中存在细胞膜内侧,在细胞凋亡早期磷脂酰丝氨酸从细胞膜内侧外翻到细胞膜表面,与Annexin V-FITC结合。而PI是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,但在细胞凋...
Annexin V-FITC/PI 细胞凋亡检测试剂盒 Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit 一、试剂盒说明 在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS )只分布在细胞膜脂质双层的内侧,而在细胞凋亡早期,细胞膜中的磷脂酰丝氨酸(PS )由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V 是一种分子量为35~36kD 的Ca 2+依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂...
根据未处理细胞空白对照和经Annexin V、PI分别细胞染色后的单染对照的分析设定十字门的位置;4 正常细胞:Annexin ⅴ-FITC (-);PI (-); 早期凋亡细胞:Annexin ⅴ-FITC (+);PI (-); 晚期凋亡细胞: Annexin ⅴ-FITC (+);PI (+); 机械性坏死:Annexin ⅴ-FITC (-);PI (+); 5 对照组凋亡比例高的原因...
5、严格可靠的质量控制,保证优异的实验结果; 6、专业的售前售后技术支持,帮助您更好完成凋亡实验。 实验效果图如下: 图:Jurkat细胞用1μM喜树碱(Camptothecin) (左) 或未加药 (右) 处理4 h,Annexin V-FITC/PI检测试剂盒染色后FCM检测。Annexin V-FITC单阳为早期凋亡细胞,Annexin V-FITC和PI双阳细胞为坏死或...
图1 Annexin V/PI检测原理。实验流程:(1)收集细胞:在进行完细胞凋亡刺激后,用预冷的PBS洗涤细胞2次,4℃离心5min,(贴壁细胞使用不含EDTA的胰酶消化);(2)重悬细胞:取1~5×105个重悬的细胞,离心弃掉PBS,加入Annexin V-FITC结合液轻轻重悬;(3)染色:加入Annexin V-FITC和PI Staining Solution,...
Annexin V-FITC/PI法的原理: 正常细胞(活细胞)具有完好的细胞膜,此时细胞膜的组分之一——磷脂酰丝氨酸(phosphotidylserine,PS)位于细胞膜的内侧,当细胞发生凋亡时,细胞膜的结构发生改变,这使得原本在细胞膜内侧的PS外翻到细胞膜的表面,这种现象在凋亡的早期就会出现,因此就可以用与PS具有高亲和力、标记了...