将Annexin V-FITC与PI联合使用,可以实现凋亡早期、凋亡晚期或者坏死细胞的区分。在流式细胞仪或荧光显微镜下观察,早期凋亡细胞由于细胞膜完整,PI无法进入,仅显示Annexin V-FITC的绿色荧光;而凋亡晚期或者坏死细胞由于细胞膜通透性增加,PI可以进入并与细胞核结合,同时Annexin V-FITC也能结合外翻的PS,因此这些细胞会...
Annexin V是一种分子量为35~36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,能与磷脂酰丝氨酸(PS)高亲和力特异性结合。在细胞凋亡早期,只分布在正常细胞膜脂质双层内侧的磷脂酰丝氨酸(PS)翻向外侧,用标记了荧光素的Annexin V作为荧光探针,并搭配PI、7-AAD、DAPI等核酸染料使用,能够准确区分正常细胞、凋亡早期和凋亡晚期细胞。
用荧光素(FITC、Alexa Fluor488等)标记的Annexin-V作为探针,利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。碘化丙啶(propidine iodide, PI)是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,但在凋亡中晚期的细胞和坏死细胞,PI能够透过细胞膜而将细胞核染红。因此将Annexin-V与PI结合使用,就可以检测出细胞群体中...
因此Annexin V是检测细胞早期凋亡的灵敏指标。 由于晚期凋亡和其他原因死亡的细胞,膜的通透性会增加,因此Annexin V一般不单独使用,往往会结合死活染料帮助进一步区分,其中最常用为核酸染料PI,7-AAD等,胞内染色用的如BD品牌的FVS系列死活染料也可以用,只是出于价格问题,成套试剂盒一般不会选用而已。 二、试剂荧光搭配的...
Annexin V 细胞凋亡检测原理 磷脂酰丝氨酸(PS)是一种带负电荷的磷脂,在正常细胞中,PS分布于细胞膜脂质双层的内侧,当细胞发生凋亡时,细胞膜上这种磷脂分布的不对称性被破坏而使PS暴露在细胞膜外。Annexin V 是一种Ca2+依赖的磷脂结合蛋白,在高钙环境下,Annexin V高亲和力结合PS,通过检测标记Annexin V的荧光...
Annexin VPI检测法原理 Annexin V是一种钙依赖性磷脂结合蛋白,能与PS高亲和力特异性结合。它不能透过完整的细胞膜,而早期凋亡细胞的细胞膜是完好的,对PI有拒染性。但在凋亡中晚期的细胞和死细胞,PI能透过细胞膜而使细胞核染上。因此Annexin V 和PI同时使用,可以将凋亡早期的细胞与其它细胞区别开来。Annexin ...
Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒是用FITC标记的Annexin V作为探针,来检测细胞早期凋亡的发生,是细胞凋亡检测实验中最常用的一种探针组合。 [检测原理] 在细胞凋亡早期阶段,细胞膜内侧的磷脂酰丝氨酸(PS)从胞质转至胞外,暴露在细胞外环境中,细胞膜通透性增加,从而被PS特异的Annexin-V探针标记。
实验原理 在细胞凋亡早期阶段,细胞膜内侧的磷脂酰丝氨酸(PS)从胞质转至胞外,暴露在细胞外环境中,细胞膜通透性增加,从而被PS特异的Annexin-V探针标记。Annexin-V为Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,对PS有极强的结合力。PI是一种经济、稳定的核酸染料,它不能透过正常细胞或早期凋亡细胞的完整的细胞膜,但可以透过凋亡...
Annexin V-FITC细胞凋亡检测技术的原理是通过标记细胞表面的Annexin V-FITC探针,观察细胞产生的荧光信号变化来判断细胞的凋亡情况。正常存活的细胞表面不会结合Annexin V-FITC,因此不会发出荧光信号。而处于早期凋亡阶段的细胞表面开始外翻磷脂,可以结合Annexin V-FITC,发出绿色荧光。在细胞凋亡进一步发展为晚期凋亡时,...
Annexin V-FITC/PI法的原理: 正常细胞(活细胞)具有完好的细胞膜,此时细胞膜的组分之一——磷脂酰丝氨酸(phosphotidylserine,PS)位于细胞膜的内侧,当细胞发生凋亡时,细胞膜的结构发生改变,这使得原本在细胞膜内侧的PS外翻到细胞膜的表面,这种现象在凋亡的早期就会出现,因此就可以用与PS具有高亲和力、标记了...