Annexin V-FITC/PI法的原理: 正常细胞(活细胞)具有完好的细胞膜,此时细胞膜的组分之一——磷脂酰丝氨酸(phosphotidylserine,PS)位于细胞膜的内侧,当细胞发生凋亡时,细胞膜的结构发生改变,这使得原本在细胞膜内侧的PS外翻到细胞膜的表面,这种现象在凋亡的早期就会出现,因此就可以用与PS具有高亲和力、标记了...
将Annexin V-FITC与PI联合使用,可以实现凋亡早期、凋亡晚期或者坏死细胞的区分。在流式细胞仪或荧光显微镜下观察,早期凋亡细胞由于细胞膜完整,PI无法进入,仅显示Annexin V-FITC的绿色荧光;而凋亡晚期或者坏死细胞由于细胞膜通透性增加,PI可以进入并与细胞核结合,同时Annexin V-FITC也能结合外翻的PS,因此这些细胞会...
Annexin-V为Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,对PS有极强的结合力。PI是一种经济、稳定的核酸染料,它不能透过正常细胞或早期凋亡细胞的完整的细胞膜,但可以透过凋亡晚期和坏死细胞的细胞膜而使细胞核染红。将Annexin V与PI联合使用时,PI被排除在活细胞和早期凋亡细胞之外,而晚期凋亡细胞和坏死细胞同时被FITC和PI结合染色...
Annexin-V(膜联蛋白-V)是一种分子量为35-36KD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,能与PS高亲和力结合。用荧光素(FITC、Alexa Fluor488等)标记的Annexin-V作为探针,利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生;碘化丙啶(propidine iodide, PI)是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,但在凋亡中晚期的细胞和坏死细...
Annexin V 细胞凋亡检测原理 磷脂酰丝氨酸(PS)是一种带负电荷的磷脂,在正常细胞中,PS分布于细胞膜脂质双层的内侧,当细胞发生凋亡时,细胞膜上这种磷脂分布的不对称性被破坏而使PS暴露在细胞膜外。Annexin V 是一种Ca2+依赖的磷脂结合蛋白,在高钙环境下,Annexin V高亲和力结合PS,通过检测标记Annexin V的荧光...
Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒是用FITC标记的Annexin V作为探针,来检测细胞早期凋亡的发生,是细胞凋亡检测实验中最常用的一种探针组合。 [检测原理] 在细胞凋亡早期阶段,细胞膜内侧的磷脂酰丝氨酸(PS)从胞质转至胞外,暴露在细胞外环境中,细胞膜通透性增加,从而被PS特异的Annexin-V探针标记。
Annexin V-FITC/PI双染法细胞凋亡实验方法 1.细胞按照实验方案进行凋亡诱导,300×g离心5 min,弃上清,收集细胞,PBS洗涤一次,轻轻重悬细胞并计数。2.取1~5×105重悬的细胞,300×g离心5 min,弃上清。用PBS洗涤细胞一次,离心后弃上清,加入100 μL稀释的1×Annexin V Binding Buffer 重悬细胞。3.细胞悬液...
细胞凋亡检测实验(Annexin V/PI双染色法) 细胞凋亡检测可以:(1)用于肿瘤细胞和组织在内的不同种类病理标本研究;(2)应用于临床诊疗,新药研制、生物制品开发、肿瘤放化疗、以及从促凋亡角度探索肿瘤的基因治疗;(3)对相关疾病的早期发现、放化疗的疗效评价具有举足轻重的地位。
Annexin V是一种结合于PS上的蛋白质,它与FITC标记结合后,可以通过流式细胞仪检测到荧光信号。 以下是Annexin V-FITC细胞凋亡检测的基本原理: 1.PS外露:在细胞凋亡过程中,磷脂酰丝氨酸(PS)会从细胞内层翻转到胞外层,暴露在细胞表面。这一步骤是凋亡的早期事件之一,通常在细胞膜破裂之前发生。 2.Annexin V的结合...
Annexin V-FITC 通常与细胞膜非渗透性核酸荧光染料联合使用以检测凋亡细胞。常用的染料是 PI。正常细胞和早期凋亡细胞的细胞膜是完整的,核酸染料 Propidium iodide(PI) 不能透过完整的细胞膜,但在凋亡中晚期的细胞和坏死细胞,PI 能够透过细胞膜与细胞核结合呈现红色。