ago2 rip实验原理go2 rip实验原理 RIP 实验基本原理: 1. 用抗体或表位标记物捕获细胞核内或细胞质中内源性的RNA结合蛋白。 2. 防止非特异性的RNA的结合。 3. 免疫沉淀把RNA结合蛋白及其结合的RNA一起分离出来。 4.结合的RNA序列通过microarray(RIP-Chip),定量RT-PCR或高通量测序(RIP-Seq)方法来鉴定。
于是,作者借助AGO2 RIP实验(云序生物提供此项服务)在实验组中拉取与AGO2蛋白直接结合的miRNA,通过miRNA 定量PCR,证实以上三个miRNA能够直接与AGO2蛋白结合,参与了海绵机制,并且也证实血小板分泌的miRNA的确是起活性的。 图2. miRNA高通量测序聚类图; miRNA定量PCR表明三者在共培养细胞中差异高表达 图3. AGO2 RIP...
01 RIP实验原理 RIP技术(RNABinding Protein Immunoprecipitation,RNA结合蛋白免疫沉淀),是研究细胞内RNA与蛋白结合情况的技术,是了解转录后调控网络的有力工具。运用针对目标蛋白的抗体把相应的RNA-蛋白复合物沉淀下来,然后经过分离纯化就可以对结合在复合物上的RNA进行分析,结合的RNA可以通过定量PCR(RIP-pcr)或高通量测...
为了进一步证实这一点,作者通过RIP-qRT-PCR显示,最丰富的内源性miRNA,包括miR100-5p、miR-148-3p、miR-10a-5p、miR-24-3p、miR-21-5p和miR-9-5p,与AGO2S417A的结合水平明显低于与AGO2WT的结合水平(图5F)。 为了确定pS417-AGO2转录后调控的基因表达,根据log2 [fold change]≥0.5(上调)或log2 [fold ...
Ago2的抗体进行RIP发现miRNA-1224和pre-circRNA-Filip1l; 通过功能实验和回复实验进一步证明Ago2在miRNA-1224调控circRNA-Filip1l的作用。 7.CircRNA-Filip1l通过调控Ubr5表达发挥作用 前面的工作主要围绕circRNA-Filip1l的上游机制展开,建立了miRNA-1224/Ago2/circRNA-Filip1l的调控轴,这一部分主要讲的是circRNA-Filip...
利用CCK-8 ,Transwell和伤口实验评估细胞生物学行为.通过Western blot分析EMT相关标志物的蛋白表达.miR-212-3p与NAP1L1的关系通过双荧光素酶报告基因和AgO2-RIP... 郭小兵,李晓文,李恒希,... - 《昆明医科大学学报》 被引量: 0发表: 2024年 百合无症病毒16kDa蛋白分析、纯化及RNA沉默响应分析 研究RNA沉默机...
产品名称: RIPAb+ Ago2, clone 9E8.2 .0 订购此产品 供应商: Millipore 规格: EA 目录价: 4551 库存状态: 3周到货 CAS编号: 应用范围: 生化实验 种属来源: 相关信息: RIPAb+ Ago2 - RIP Validated Antibody and Primer Set Close REFERENCES Characterization of polysaccharide production of haemophilu...
科研进展：miRNA通过AGO2调控circRNA表达circRNA通过吸附miRNA发挥作⽤的⽂章已经⽐较多了，今天我们来看⼀篇miRNA调控 circRNA的⽂章：MicroRNA-1224 splicing circularRNA-Filip1l in an Ago2- dependent manner regulates chronic inflammatory pain via targeting Ubr5. J Neurosci. 2019 Jan 16. pii: 1631...
采用 qRT-PCR 技术检测 IRAK1/TRAF6 的表达水平.在 HepG2.2.15 细胞中,再分别转染 miR-146a mimic 及 Argonaute2蛋白(Ago2)siRNA 48h 后,western blot和qRT-PCR技术检测Ago2蛋白水平;Ago2 RIP(RNABinding ProteinImmunoprecipitation;RNA 结合蛋白免疫沉淀技术)后,qRT-PCR检测miR-146a的表达水平;Ago2 siRNA后...
C Ago2 RNA immunoprecipitation (RIP) was performed, followed by qRT–PCR. A RIP assay with an Ago2 antibody was used to assess the binding ability between miR-144/451 and Ago2 mRNA in wt MEFs, TAp63−/− MEFs, or TAp63−/− MEFs transfected with a TAp63 expression construct. ...