Cre/loxP重组酶系统,指的是条件性基因打靶、诱导性基因打靶、时空特异性基因打靶策略的技术核心,Cre重组酶可以识别LoxP序列并进行重组,在新型基因打靶中获得广泛应用,是由Sternberg和Hamilton提出,应用于小鼠基因工程中的重要工具。派真生物提供的AAV-Cre可以灵活、高效地敲除Gene-floxed小鼠,免去Cre小鼠维系及与Genefloxed...
2024年9月19日-10月31日期间,凡订购现货KO/CKO小鼠或构建基因编辑小鼠模型的新老客户均可领取1000元代金券,用于下单Cre现货AAV病毒及AAV病毒定制服务。 赛业生物依据多年病毒包装平台的经验,采用三质粒共转染的方法和先进的纯化工艺,现提供高纯度、高滴度、多种血清型的AAV现货病毒,基因类型包含EGFP、mCherry及Lucife...
(1) 两个loxP位点位于同一条DNA链上且方向相同,Cre重组酶敲除loxP间的序列; (2) 两个loxP位点位于同一条DNA链上且方向相反,Cre重组酶诱导loxP间的序列翻转; (3) 两个loxP位点位于不同的DNA链或染色体上,Cre重组酶诱导两条DNA链发生交换或染色体易位; (4) 四个loxP位点分别位于两条DNA链或染色体上,Cre重组酶...
案例1:研究人员通过在老鼠视神经节细胞注射衣壳突变的AAV2携带CRE重组酶来构建组织特异性的Rosa26 (R26) 转基因小鼠,用来研究RGC退行性疾病以及视神经疾病。109的AAV病毒量就能够有效的感染鼠神经节细胞层神经元,并且可以持续表达长达11 weeks。 CRE的表达对RGC早期5 weeks内没有显著影响,但往后细胞会出现死亡。结果...
一种名为SELective Expression and Controlled Transduction In Vivo (SELECTIV)的模型系统,该系统通过将腺相关病毒(AAV)载体与Cre诱导的AAVR(AAV受体)过表达相结合,实现了对转基因的高效和特异性表达。研究团队通过实验证明,在转基因小鼠中过表达AAVR可以显著提高多种细胞类型的转导效率,包括通常对AAV转导有抗性的肌...
01、两个loxP位点位于同一条DNA链上且方向相同,Cre重组酶敲除loxP间的序列 02、两个loxP位点位于同一条DNA链上且方向相反,Cre重组酶诱导loxP间的序列翻转 03、两个loxP位点位于不同的DNA链或染色体上,Cre重组酶诱导两条DNA链发生交换或染色体易位 图1 Cre-lox系统介导的DNA重组机制(来源网络) ...
利用AAV病毒载体特异性的血清型和启动子的优势,通过病毒注射的形式获得:AAV-Cre+转基因小鼠或者Cre小鼠+AAV-LoxP序列,病毒在注射7天后即大量表达,极大的提高了条件性敲除/过表达小鼠模型的应用效率。 2. 神经系统标记 利用AAV载体血清型、启动子及其跨神经突触顺行或者逆行表达等特性,可以进行特定神经元标记、神经...
图7. Ikbkap基因敲除小鼠中，cre在有丝分裂后的神经元中表达 三、注射方式 AAV感染外周神经系统的注射方式包括原位注射和系统性注射。原位注射，即根据实验需要在特定的部位进行注射，更适合局部组织的研究。PNS缺乏很精确的坐标系，所以准确重复地靶向特定的神经节或周围神经中具有较强的挑战性，但目前已有研究人员将...
在这篇文章中,作者将AAV-Cre-EGFP鞘内注射到SIRT1flox/flox小鼠中,作者采用了hSyn+AAV9的构建方式,靶向到脊髓的神经元。注射滴度和体积分别为4.7E+10vg,10μl。结果表明STRI1的敲除会诱导疼痛行为并且增强脊髓背角神经元的突触可塑性。 对于星型胶质细胞...
另一种方法是运用cre-loxp系统进行的敲除，前提是必须要有flox动物，再配合AAV-cre使用即可实现靶基因的敲除。11、需要对动物进行造模，什么时间注射AAV合适？AAV的表达高峰在注射后3-4周，然后结合动物造模的时间、注射AAV的目的来推算注射时机。比如AAV调控基因表达进而起治疗作用，则一般要把控AAV的表达高峰期与...